间充质干细胞(MSCs)对神经胶质瘤趋化能力研究

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目的:该实验以立体定向技术建立C6大鼠胶质瘤模型;分离培养并建立稳定增殖的人脐血间充质干细胞(MSCs)株系,利用流式细胞技术鉴定其表面抗原,诱导分化证明其分化潜能;应用免疫组织化学方法观察MSCs对胶质瘤组织的趋化能力及分布规律,为以MSCs为细胞载体的靶向治疗提供实验依据.方法:从健康足月新生儿脐血中分离出间充质干细胞加以培养,以多种抗体标记其表面抗原,用流式细胞仪检测,并行体外诱导分化实验,确定所获细胞是间充质干细胞.借助立体定向仪在大鼠脑组织内定点注射C6大鼠胶质瘤细胞,建立胶质瘤模型.模型建立七天后,再次在立体定向仪的指示下,在模型鼠脑组织中输注预先用BrdU标记的人间充质干细胞.按注入位置分为原位组、同侧半球组和同侧脑室组.六至八天后,处死大鼠,灌注固定后取脑.进一步制作成石蜡切片,以苏木素伊红(H.E.)染色确定胶质瘤组织的范围.相邻切片采用免疫组织化学方法(ABC法)显示标有BrdU的MSCs,观察其在胶质瘤组织和周围正常脑组织中的分布规律.结果:1、大鼠胶质瘤模型成功建立,H.E.染色下胶质瘤组织与周围正常脑组织分界清楚.2、原位组、同侧半球组和同侧脑室组均可见MSCs在胶质瘤组织中广泛分布,而在周围正常脑组织中很少见.特别是在胶质瘤组织与正常组织交界处,这一定向分布更为明显.小结:在大鼠胶质瘤模型中,人间充质干细胞对胶质瘤组织表现出明显趋化性,能从远处向胶质瘤组织迁移并定位于其中.显示MSCs可作为一种潜在的细胞载体用于神经胶质瘤的靶向治疗.上述结果尚未见到国内外相关报道.
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