1,3-丙二醇(1,3-propanediol，简称1,3-PD)是一种重要的化工原料，被广泛应用于印染、涂料、油墨、药物、抗冻剂、润滑剂等领域，尤其作为单体合成新型聚酯材料 PTT（聚对苯二甲酸丙二醇酯）受到人们广泛关注。1,3-PD的生产方法主要有化学合成和微生物发酵法，由于石化资源的短缺，近年来微生物发酵法生产1,3-PD成为国内外研究的热点。　　肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）是微生物发酵产1,3-PD的常用菌株，以甘油为代谢底物，K.pneumonia一方面通过还原途径在甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶的作用下产1,3-PD；另一方面菌体自身生长和还原当量的产生均通过氧化途径获得，这个过程中其他代谢产物的产生不可避免，乳酸、乙醇等副产物的累积，又会影响到菌体本身的生长，严重影响甘油向1,3-PD的转化，为后续分离提取带来困难，最终抬高了生产成本。本实验室前期工作，筛选了一株高产1,3-PD的K.pneumonia，且经过发酵实验分析，副产物中乳酸和乙醇含量相对较高。　　本文利用λRed重组技术分别对K. pneumonia产乳酸和乙醇代谢途径中的关键酶乳酸脱氢酶基因（ldhA）和乙醛脱氢酶基因（aldH）进行敲除，获得了高产1,3-PD的基因缺失菌株K.pneumonia2-1ΔldhA和K.pneumonia2-1ΔaldH，经过5L发酵罐初步发酵研究，乳酸脱氢酶基因缺失菌株 K.pneumonia2-1ΔldhA与初始菌株K.pneumonia2-1相比，在对数生长期生长比较旺盛，最高OD值由原来的12.67长到现在的14.34，生长较原来旺盛，利于1,3-PD的产出，原始菌株K.pneumonia2-1发酵到20h时1,3-PD浓度达到最大值78.83g/L，生产强度为3.28g/(L·h)，质量转化率为60.64％。经过改造后K.pneumonia2-1ΔldhA产1,3-PD能力有所提高，发酵到20h时1,3-PD的最大浓度为85.76g/L，生产强度为3.57 g/(L·h)质量转化率为65.97%，比原始菌株 K.pneumonia2-1提高了5.33%。乳酸浓度由原来的10.16g/L降到0.49g/L，极大地减少了乳酸的产量。乙醛脱氢酶基因缺失菌株K.pneumonia2-1ΔaldH与初始菌株K.pneumonia2-1相比，在对数生长期生长比较旺盛，最高OD值由原来的12.67长到现在的14.23，生长较原来旺盛，利于1,3-PD的产出，原始菌株K.pneumonia2-1发酵到20h时1,3-PD浓度达到最大值78.83g/L，生产强度为3.28g/(L·h)，质量转化率为60.64%。经过改造后K.pneumonia2-1ΔaldH产1,3-PD能力有所提高，发酵到18h时1,3-PD的最大浓度为82.55g/L，生产强度为3.43 g/(L·h)质量转化率为63.50%，比原始菌株K.pneumonia2-1提高了2.86%。乙醇浓度由原来的7.24g/L降到0.47g/L，极大地减少了乙醇的产量。