胆汁外引流对重症急性胰腺炎大鼠胰腺的保护作用及机制的实验研究

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目的:研究“胆汁外引流”对由4%牛磺胆酸钠方法构建大鼠重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)模型的保护作用及机制。观察胰腺组织内核转录因子Kappa B(NF-κB)蛋白的表达,血清内血红素氧合酶1(HO-1)、高迁移率族蛋白1(HMGB-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的含量以及胰腺组织病理学变化。方法:健康雌性(Sprague-Dawley,SD)大鼠108只,采用逆行十二指肠穿刺胰胆管途径注射4%牛磺胆酸钠方法构建大鼠SAP模型。实验动物分为假手术组和模型组:(1)假手术组分为假手术未引流组(Sham Operation Group,SOG组)和假手术引流组(Sham Drainage Group,SDG组),每组18只。(2)模型组分为模型未引流组(Severe Acute Pancreatitis,SAP组)、模型引流组(Bile Drainage Group,BDG组)每组18只。(3)各组于建模成功后的第3h、6h、12h将大鼠(各时间点n=6)再次麻醉后开腹观察,并取血和胰腺等组织,检测血清AMY的指标,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清细胞因子TNF-α、HO-1、HMGB1和IL-10的表达和含量,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定胰腺组织内NF-κB P65蛋白表达。通过HE染色大鼠胰腺组织观察其病理学变化。结果:建模后3h、6h、12h:(1)BDG组血清AMY、TNF-α的水平均低于SAP组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)BDG组的血清HMGB1水平低于SAP组,在6h时,差异有统计学意义(P<0.05);(3)BDG组血清IL-10的水平与SAP组比较,差异无统计学意义(P>0.05);(4)BDG组血清HO-1水平高于SAP组,差异有统计学意义(P<0.05)。BDG组胰腺组织内NF-κB mRNA蛋白表达水平低于SAP组,在3h、6h时有统计学意义(P<0.05)。BDG组的病理评分值低于SAP组,差异有统计学意义(P<0.05);并且随着时间的推移,大鼠病理评分值呈增高趋势。结论:(1)逆行胰胆管穿刺建立大鼠SAP模型是一种简单操作、重复性好,具有一定稳定性的建模方法,可以满足胆汁外引流对胰腺功能保护作用研究的动物实验需要。(2)胆汁外引流提高SAP模型大鼠的抗炎细胞因子的表达,并且显著抑制机体促炎细胞因子的释放,缓解了胰腺组织的进展。(3)胆汁外引流能改善SAP模型大鼠胰腺组织炎症状况下的病理变化,减轻胰腺组织损伤。
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