肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL),或称凋亡素2配体(Apo2 ligand, Apo2L)是肿瘤坏死因子超家族的一员,与死亡受体结合,通过多种信号转导通路,能有效地诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,而对大多数正常细胞无明显毒性,有望成为一种新的肿瘤治疗手段。因而TRAIL自从1995年被发现以来,便引起了广泛关注。但是,越来越多的研究表明,很多肿瘤细胞,尤其是恶性肿瘤细胞对TRAIL诱导的凋亡作用的敏感性较低,甚至完全耐受。一些原本对TRAIL敏感的肿瘤细胞经过TRAIL反复处理后也会获得抗性。所以,如何增强肿瘤细胞对TRAIL的敏感性,成为研究的热点领域。白杨素(5,7-二羟基黄酮)是一种天然黄酮类化合物,广泛存在于多种植物、蜂胶和蜂蜜中,是蜂胶的主要有效成分。白杨素具有抗氧化、抗病毒、抗炎症等多种药理活性。本实验研究了白杨素增强人肝癌HepG2细胞株、人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株、人子宫颈癌HeLa细胞株对TRAIL敏感性的作用,并进一步探索了白杨素增强HepG2细胞株对TRAIL敏感性的可能机制。结果表明白杨素能明显下调HepG2细胞中IAP家族蛋白c-IAP1cIAP2XIAP和Survivin的表达及Bcl家族抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达。另外,白杨素有效降低HepG2细胞中磷酸化Akt、STAT3、JNK-1/2的水平,从而减弱细胞内的存活信号,增强凋亡作用。白杨素对人正常肝细胞L-02细胞株无细胞毒作用,并且不增强TRAIL诱导的凋亡,安全性良好。因此,白杨素展示了在肿瘤的治疗和预防中巨大的应用潜力。细胞凋亡的缺失代表了癌症发展的一个主要因素。肿瘤细胞逃避凋亡的能力在它们对常规治疗药物产生抗性方面发挥了重要作用。因此,诱导肿瘤细胞凋亡是抗肿瘤治疗的重要策略之一。在过去的几十年里,抗肿瘤研发人员在寻找特异性诱导肿瘤细胞凋亡的药物上花费了巨大的努力。七叶皂苷钠,是从中国药典收载的中药天师栗或者德国药典收载的欧马栗的干燥成熟果实提取的三萜皂苷钠盐的天然混合物,包含七叶皂苷钠A、B、C、D四种成分。七叶皂苷钠1994年在中国上市,用于治疗创伤或手术所致的水肿。七叶皂苷钠在临床上作为抗水肿、抗渗出及血管保护药物已有很多年,安全性良好。七叶皂苷钠治疗慢性静脉功能不全和水肿的机制已被研究清楚。但是,鲜有文章报道七叶皂苷钠的抗肿瘤作用。七叶皂苷钠抑制人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖的作用机制未见报道。因此,本实验研究了七叶皂苷钠对人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的细胞毒作用,并提出了七叶皂苷钠诱导Jurkat细胞凋亡的可能机制。MTT结果显示,七叶皂苷钠浓度依赖、时间依赖地抑制Jurkat细胞增殖,并用Hoechst33258染色、DNA片段分析、AnnexinV-FITC/PI双染三个实验进行凋亡检测。在七叶皂苷钠处理后的Jurkat细胞中检测到了凋亡的形态学特征、DNA Ladder条带、Annexin V+/PI细胞(早期凋亡细胞)的显著增加。七叶皂苷钠活化Jurkat细胞中起始caspase-8、caspase-9,效应caspase-3,切割聚(ADP-核糖)聚合酶[poly (ADP-Ribose) Polymerase, PARP],并减少Bcl-2的表达。此外,不同肿瘤细胞对七叶皂苷钠的敏感性不同,在检测的细胞中以Jurkat细胞的敏感性最高。总之,这些数据表明七叶皂苷钠能有效地诱导Jurkat细胞凋亡。