膀胱癌是一种临床常见的癌症,世界范围内,在男性常见癌症中排第四,因癌症死亡原因中排第九。引起癌症死亡的男性对女性的比率约为3：1。根据统计,2010年美国约70530例新增膀胱癌症病人和14680例癌症相关性死亡病例。尽管很多膀胱癌病例发生时没有明显的暴露在癌基因下,但癌基因有很多诱发因素。膀胱癌的发病与地理、环境、种族、性别、血吸虫感染、吸烟、职业暴露以及遗传易感性等因素有关。外界因素直接或者间接作用,可以诱发膀胱尿路上皮细胞DNA异常改变,从而引起细胞生长失控,最终激活膀胱癌发生的共同生物学通路。膀胱癌的发生发展是一个多步骤的过程。在肿瘤发生发展的每个阶段都有不同的分子遗传学改变,这些基因型异常改变的长期积累最终导致恶性表型的出现。膀胱癌的分子遗传学改变主要包括两类：一类改变与低分级的肿瘤相关。这类改变促进细胞增殖,但对细胞微环境、细胞分化及细胞死亡和凋亡的作用很小或没有作用。另一类改变则与高分级的肿瘤发生相关。这类改变导致细胞增殖失控,使细胞周期和细胞凋亡失调节,与细胞分化密切相关。由正常上皮细胞向肿瘤细胞的发展过程中涉及许多基因的改变,包括癌基因、抑癌基因、细胞周期相关基因、细胞凋亡相关基因和DNA损伤修复相关基因等。在肿瘤学前沿领域研究中,作为关键调控因子的蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)最近认为其与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关,因而引起人们的极大兴趣。CIP2A作为一种新发现的原癌基因,可以通过稳定C-Myc、促进细胞增殖和锚定独立生长、阻滞衰老和分化来促进体内恶性肿瘤的发生和发展。因而受到极大的关注。本论文对CIP2A是否可以作为膀胱癌的诊断标志物进行了初步的研究。在分子水平,我们从临床筛选了46例新鲜膀胱上皮组织标本,其中38例为膀胱尿路上皮癌,8例为正常膀胱移行上皮。在38例肿瘤组织样本中有29例(76.32%)检测到CIP2A mRNA的表达,而8例膀胱正常移行上皮未检测到CIP2A mRNA.在蛋白水平,我们从临床筛选出111例石蜡组织标本(其中99例为膀胱尿路上皮癌组织,12例为正常膀胱移行上皮)进行切片,利用免疫组织化学染色法检测了CIP2A在膀胱尿路上皮癌组织中的蛋白表达情况。在正常组织中未发现C工P2A的蛋白表达。而在99例膀胱尿路上皮癌组织中有63例(63.64%)表达了C工P2A的蛋白。这说明CIP2A在膀胱肿瘤中的表达更具特异性。因此CIP2A有可能作为一种新的肿瘤标志物应用于膀胱肿瘤的诊断中。同时其作为治疗靶点的研究还需更进一步的深入研究。骨桥蛋白(osteopont in,OPN)是一种具有多种功能的分泌性磷酸化糖蛋白,可促进细胞的黏附和迁移,被认为是恶性转化的分泌性蛋白,分布广泛。其在恶性肿瘤患者的肿瘤组织和血液中的表达水平,与肿瘤患者筛选、病情预测和预后有着重要的联系。近年来,越来越多的研究发现,OPN通过与细胞膜上受体CD44及整合素结合而发挥作用,与肿瘤细胞生长、增殖、浸润及转移密切相关,在乳腺癌、肝癌等大部分肿瘤及其转移复发组织中高表达,在Yeatman等新的肿瘤标志物和肿瘤进展标志物的分子大百科全书中,OPN被确定为临床首选标记物。本课题选取90例临床来源的膀胱组织石蜡标本(其中80例为膀胱尿路上皮癌,10例为正常)做切片,在蛋白水平利用免疫组织化学技术分析OPN蛋白在膀胱尿路上皮癌和正常移行上皮的表达情况。在正常组织中大部分病例CIP2A蛋白的表达为阴性(80.00%)。而80例膀胱尿路上皮癌组织中有59例(73.75%)为表达阳性。这说明相比于正常膀胱移行上皮组织,OPN具有一定的特异性,有希望成为膀胱尿路上皮癌早期筛查和诊断的协同分子标记物。最后,通过免疫组化结果的统计学分析可以看出CIP2A的表达,与病人的年龄、性别、临床的分期、分级、组织病理类型等这些临床指标,无明显的相关性。但CIP2A与OPN在膀胱尿路上皮癌组织样本中的蛋白表达有明显的相关性,提示两者在蛋白协同表达方面具有统计学意义。同时CIP2A.OPN蛋白表达主要在细胞胞浆、同时部分细胞核也有阳性表达的定位,也显示了两者在位置及表达强度上具有一致性。CIP2A和OPN在临床标本蛋白水平免疫组化的协同表达结果,提示了两者结合作为膀胱肿瘤的标记物的研究应用前景。综上所述,我们从临床实际问题出发,采用临床组织样本和临床资料,从标志物的遗传和生化调控的视角,深入揭示CIP2A和骨桥蛋白(肿瘤或间质来源的)两者之间可能具有的协同表达机制和临床应用价值。既往研究中CIP2A和骨桥蛋白多效性的功能在肿瘤发生发展中的作用,及本课题临床标本检测的突出意义显示出,CIP2A和OPN作为膀胱尿路上皮癌诊断分子标记物的可能。进一步深入了解有关CIP2A和骨桥蛋白调节的信号转导通路,将有助于这两种分子标记物作为对抗癌症的新型分子诊断和靶向治疗标记物的可能。