血管内皮细胞生长因子可溶性受体克隆、表达及其对血管生成抑制作用

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目的:VEGFR 属于酪氨酸激酶类,有细胞膜外与VEGF结合区、跨膜区和细胞内酪氨酸蛋白激酶;其mRNA的不同剪切,产生两种功能完全不同的受体,其一为完整的受体,另一为只有与VEGF结合功能的可溶性膜外片段,对VEGF功能起负性调节作用.为此我们克隆并表达了VEGFR膜外片段,以探讨其生物学功能.结论:1.KDR 基因片段能在QIA原核表达系中得到表达,表达量占菌体蛋白的5﹪左右.复性后该表达重组蛋白具有与VEGF 结合的生物学活性.但Pichia酵母表达系统似乎不表达KDR 片段,或表达量低于该文的检测手段的敏感性.2.sFLT-1基因片段能在QIA表达系统中得到表达,但表达量较低,在高浓度肉汤培养基中表达量略高.复性后重组sFLT-1具有与VEGF特异结合的功能.3.可溶性VEGF受体能够抑制VEGF诱导的血管内皮细胞增殖和鸡胚绒毛尿羹膜血管生成作用,且可溶性受体和血管抑素在细胞和组织水平具有协同作用.4.可溶性VEGF受体KDR片段对肿瘤生长具有抑制作用,这种抑制作用可能与KDR中和VEGF,而引起血管密度降低有关.
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