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针对肉苁蓉细胞悬浮培养的特点以及食品添加剂安全性的要求,设计了无外源激素悬浮培养肉苁蓉细胞培养模式,研究了其对肉苁蓉悬浮细胞生长和次生代谢产物积累的影响,同时考察了糖代谢和内源激素代谢相关酶的变化。通过前体饲喂和诱导子添加,有效地促进了无外源激素悬浮培养肉苁蓉细胞合成苯乙醇苷(PeGs)的能力。采用响应面分析法优化PeGs超声波提取工艺,并与性温、具有抗氧化活性的红茶复配,开发具有特殊药理活性的苁蓉速溶茶。研究结果如下:设计的无外源激素悬浮培养模式,既不影响肉苁蓉细胞的生长,也不影响主要次生代谢产物的合成。在第21d收获时,细胞干重、苯乙醇苷、总黄酮和多糖的产量分别达18.5g/L、3.64、0.75和4.2g/LDw,均比添加外源激素悬浮培养的肉苁蓉细胞(HC)合成产量高。无外源激素悬浮培养肉苁蓉细胞(HFC)过程中,消耗蔗糖速率较慢,内源激素代谢相关酶IAA氧化酶和细胞分裂素氧化酶活性变化趋势相似。然而肉苁蓉细胞合成PeGs的能力不稳定,代与代之间变化相对较大。苯丙氨酸、酪氨酸和膨润土在无外源激素悬浮培养过程中均能增强PeGs含量的积累。在第12d分别添加时,其最适浓度分别为0.3mmol/L、0.03mmol/L和1.5g/L,细胞中PeGs的产量分别是对照HC的2.02、2.02和2.5倍。在上述浓度基础上,确定了它们的最佳添加时间分别为第8d,12d和16d,PeGs的产量分别是对照HC的1.49、1.41和1.25倍。通过在第16d协同添加苯丙氨酸、酪氨酸和膨润土诱导,PeGs产量达到最高8.21g/LDw,比对照HC提高了24%。利用响应面法对超声提取无外源激素悬浮培养肉苁蓉细胞中PeGs的工艺条件进行优化,得到了最佳工艺条件:乙醇浓度50%,超声功率200W,超声时间14min,液料比90:1,PeGs的一次提取得率达27.63%。采用正交试验获得最优红茶提取工艺为:浸提温度90℃,浸提时间15min,料液比1:20,浸出率达到23.33%。以肉苁蓉悬浮细胞和红茶浸提液为原料,研制出具有保健功能的苁蓉速溶茶,最佳配方为:红茶:肉苁蓉浸提液:30:5,麦芽糊精11.67%,柠檬酸0.15%,蔗糖5%。利用现代生物技术开展无外源激素悬浮培养肉苁蓉细胞,提取生物活性产物PeGs开发速溶茶,是解决市场需求和保护野生资源的有效途径,具有很高的经济价值和生态效益,在中草药细胞培养和食品加工领域具有极其重要的意义。