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目的探讨可溶性Fractalkine对于H9C2心肌细胞的增殖的影响;进一步探讨可溶性Fractalkine对H9C2心肌细胞凋亡的影响及黄芪甲苷的干预作用。方法首先分别选用 Ong/ml、100ng/ml、200ng/ml、300ng/ml、400ng/ml、500ng/ml的可溶性Fractalkine刺激H9C2心肌细胞,分别于0、12、24、36、48小时采用MTT法检测可溶性Fractalkine对心肌细胞增殖的作用;计算出可溶性Fractalkine作用的最佳时间及最佳作用剂量;然后分别采用Ong/ml(A组)、200ng/ml(B组)、200ng/ml可溶性Fractalkine+50mg/L黄芪甲苷(C组)刺激H9C2心肌细胞,通过荧光染色检测细胞的凋亡情况;并进一步应用流式细胞仪测定细胞凋亡百分数,通过蛋白免疫印迹(western blotting)及实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定可溶性Fractalkine对H9C2心肌细胞凋亡的影响。计量资料采用均数±标准差((?)±s)表示,采用非配对t检验或单因素方差分析,按P<0.05的检验水准,具有统计学意义。结果1.低剂量的可溶性的Fractalkine就能够抑制H9C2心肌细胞的增殖;而且此抑制作用随着可溶性Fractalkine浓度的增加及作用时间的延长而增加,各组间有统计学差异;得出最佳作用时间为24小时,半数抑制剂量为277.5ng/ml;2.通过荧光染色发现可溶性Fractalkine可诱导心肌细胞凋亡;应用黄芪甲苷后可见凋亡细胞减少;3.Annexin-FITC检测细胞凋亡率,显示A组、B组、C组凋亡率分别为4.13 ±0.07%,41.64±0.75%,34.07±0.55%;提示可溶性 Fractalkine 可诱导 H9C2 心肌细胞凋亡(P<0.001),而黄芪甲苷可以抑制这种作用(P<0.01);4.Western blotting结果显示,B组Bcl-2的表达减少,Bax的表达增加(P<0.05),应用黄芪甲苷后可抑制这种作用(P<0.05);5.RT-qPCR结果显示:B组Bcl-2mRNA的表达量明显减少,而BaxmRNA的表达量明显增加(P<0.001),应用黄芪甲苷后可抑制这种作用(P<0.01)。结论1.可溶性Fractalkine可抑制H9C2心肌细胞增殖,此作用随着可溶性Fractalkine浓度的增加及作用时间的延长而增大;2.可溶性Fractalkine可诱导H9C2心肌细胞发生凋亡;3.黄芪甲苷可减少可溶性Fractalkine诱导的H9C2心肌细胞凋亡。