城市固体废弃物卫生填埋处理体系中抗生素抗性基因传播机理与控制研究

来源 :华东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guao_jie
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目前,我国每年约有1.8亿吨城市垃圾通过卫生填埋的手段来处置。由于多数城市的固废管理水平不够完善,大量重金属、抗生素等具有生物毒性的新型污染物进入会到城市固体垃圾中,导致城市固体垃圾填埋场成为抗生素抗性基因(ARGs)的一个重要污染源。在填埋体系长期的稳定化过程中,各种理化指标会发生大幅变化,这有可能使ARGs在不同填埋期和环境相中,表现出较大差异,但目前针对整个填埋体系内ARGs的扩散机理尚不清楚。此外,目前渗滤液处理工艺对ARGs这类新型污染物的去除效果、以及其随处理后出水进入环境后的传播表现,仍有待进一步研究。本研究通过采集上海地区填埋场不同填埋阶段的样品,结合实验室填埋反应器,利用定量PCR、高通量测序和生物信息学等手段,分析ARGs在填埋不同环境中的变化,阐释填埋环境中ARGs的传播机理。通过对实际渗滤液进行处理并模拟与河水混合的方法,评价不同渗滤液处理技术对ARGs的削减和传播控制能力。本文的主要研究内容和重点结论如下:1.填埋体系中ARGs变化规律与传播机理的系统性研究:本研究聚焦了上海地区填埋场30年填埋体系内,12种ARGs、4类抗生素、常见重金属、微生物群落、理化指标的变化情况。研究发现,填埋初期样品抗生素的含量要显著高于中期和后期(313.5±212.7μg/kg vs.138.3±117.2μg/kg),但ARGs的丰度却基本保持在6.5 log10(copies/ngDNA);在渗滤液中,抗生素从初期的1484.5±179.9 ng/L,降低到后期的922.8±180.3 ng/L,但ARGs在后期样品中的显著富集(6.0 vs.7.2 log10(copies/ngDNA))。重金属含量呈现逐渐下降(3500-500 mg/kg)的趋势,而在渗滤液样品中则表现为缓慢上升(8-15 mg/L)。固体垃圾和渗滤液的细菌群落存在显著差异。而在不同填埋阶段,渗滤液之间结构差异较固体垃圾更大,其环境条件对群落结构变化影响也更显著。但样品间优势菌群在基本一致,主要为Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidetes门(>40%)。在渗滤液中,ARGs的传播和富集主要与可移动基因元件(MGEs)的丰度有显著正相关,即通过MGEs的结合,ARGs可以在不同细菌(种)间完成基因水平传播(HGT),并且抗生素、重金属表现出和目标ARGs较紧密的关联性。而在固体垃圾中,MGEs的作用有了明显的下降,目标ARGs的结构主要受到该环境中细菌群落组成的影响,同时表现出显著性相关。2.实验室填埋反应器模拟研究:通过实验室构建填埋模拟反应器(25 L)并在密闭厌氧及准好氧条件下运行,人为添加抗生素盘尼西林(PenG)和磺胺二甲基嘧啶(SMZ)混合液,重金属(铬酸钾(K2CrO4)与硫酸锌(ZnSO4)混合液),来模拟分析填埋场中磺胺类和β内酰胺类ARGs的产生特征及变化规律。在重金属和抗生素刺激的条件下,目标ARGs分别有了上升(磺胺类)和下降(β内酰胺类)的趋势,且抗生素投加造成的变化较为迅速;准好氧有助于目标ARGs的产生。而厌氧显著地降低(或是延缓)了ARGs在渗滤液中的产生。此外,利用MGEs丰度存、氧含量和pH进行多元回归,可以预测磺胺类ARGs变化,且该方程可有效地模拟实际渗滤液中磺胺类ARGs的变化。β内酰胺类ARGs丰度变化可通过偏最小二乘法(PLS-PM)模拟,结果显示其与MGEs、COD、pH值有较大的负向关联,模拟结果与实际渗滤液样品一致,推测其丰度变化可能和携带物种(细菌)的变化有关。3.不同处理技术对ARGs的削减和传播控制能力研究:该部分以实际渗滤液处理厂的膜生物反应器(MBR)出水、超滤(UF)出水、以及实验室进行的渗滤液紫外(UV)照射出水和基于TiO+UV照射的高级氧化出水(AOP)为研究对象,分析了其中ARGs丰度的变化,发现MBR过程显著富集了进水(渗滤液原水)中的总目标ARGs丰度(8.9±0.04 log10(copies/ngDNA)),尤其是临床类重要的β内酰胺类ARGs(6.1±0.1 log10(copies/ngDNA))。UF可以将MBR富集的ARGs从出水中显著去除约1.5个数量级,后续的UV和AOP照射使出水中总ARGs丰度降低至<6.5 log10(copies/ngDNA),基本与地表水持平。此外,通过将各处理工艺出水和地表河水模拟混合发现,不同渗滤液处理工艺的出水均提升了混合后水体中MGEs和ARGs丰度约1-2个数量级和2-3个数量级,同时也增加了ARGs和MGEs的关联性。表明所选处理技术对渗滤液出水中ARGs的传播控制能力十分有限。综上,本研究揭示了30年填埋体系中ARGs的变化传播机理,通过构建和运行填埋反应器,预测并验证了ARGs在渗滤液中丰度变化的特征,指出了传统的渗滤液处理技术会导致受纳水体中ARGs的富集、传播能力的增强,增加潜在抗生素抗性风险。研究结果对垃圾填埋场等相关人为源污染环境中ARGs的传播机理探究、丰度变化预测及风险控制相关研究提供了重要的理论依据。
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