许氏平鲉的胚胎离体培养及仔稚幼鱼胚后发育研究

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许氏平鱼由(Sebastes schlegelii Hilgendorf)分布于我国黄渤海区,是我国北方海域重要的养殖经济鱼类。本文采集繁殖期许氏平鲉雌鱼的卵巢,获得其受精卵和胚胎,通过离体培养方法对其早期发育进行形态学观察和描述。并以工厂化养殖培育出的仔鱼为对象,从形态学和组织学的角度探讨其胚后发育的特征,以期为实时获得许氏平鲉大量胚胎和仔鱼探索科学方法,为实现许氏平鲉的全人工繁育和育种提供技术支撑。1.许氏平鲉受精卵及胚胎离体培养生物学研究许氏平鲉的胚胎和早期仔鱼在母体卵巢内发育,胚胎发育所需的营养靠其自身的卵黄提供。本实验通过离体培养试验发现,以海水硬骨鱼类生理盐水为离体培养液,在水温15-16℃,pH7.4-7.8,盐度21-23,24h不间断充气的条件下,许氏平鲉胚胎可发育至孵化。其中胚胎发育期可划分为27个时期,从受精卵到仔鱼孵出至少需要200h以上的时间。通过设置含有不同添加物的离体培养液对照组发现,添加了许氏平鲉血清和许氏平鲉卵巢组织匀浆的离体培养液对胚胎的离体发育具有一定的促进作用。实验中发现离体培养液的盐度变化对于胚胎的生长生存具有重要影响,盐度过高易导致胚胎死亡。2.许氏平鲉仔稚幼鱼胚后发育的形态学观察本实验通过许氏平鲉的人工育苗试验,对其仔稚幼鱼的生长发育过程进行了连续的观察描述,结果表明:早产仔鱼体长4mm左右,通体透明,可在光镜下观察到各个组织器官,包括封闭的原始消化道,跳动的心脏以及动脉内流动的血液,颅脑顶部、腹部上侧及躯干部上下两侧出现树枝状和菊花状的黑色素细胞。ldpb(产后的天数)仔鱼体长4.8-6mm,此时仔鱼已开口,黑色素较早产仔鱼为多。8dpb仔鱼出现腹鳍和背鳍原基,鳃盖棘和顶枕棘明显,摄食能力和运动能力显著提高,此后鱼体进入稚鱼期。45dpb,鱼体全长为30.4-35.5mm,体长为25.5-30.4mm,此时黑色素细胞消退,鱼体呈金黄色,躯干部出现4-5条横纹,鳃盖棘发达,此时鱼体、鳍型和各部分比例与成鱼基本相同,变态完成,发育进入幼鱼期,游泳和躲避敌害能力均大大增强,开始转入水体下层活动。3.许氏平鲉仔稚鱼胚后发育的组织学观察本实验采用组织学研究方法,观察了许氏平鲉仔稚鱼器官早期发育。结果表明.初孵仔鱼即早产仔鱼的消化道还没有分化,食道、胃、肠道等差别不明显,可观察到肝脏处于卵黄囊与消化道之间,出现肝血窦和早期的胰腺细胞。1dpb仔鱼消化道已经分化发育,胃腔大小开始超过肠腔,肠道后段已出现粘膜褶皱,肝脏依然连接卵黄囊。12dpb稚鱼胃可以明显分为贲门部、胃体和幽门部,胃体粘膜下层出现了胃腺细胞,肠道出现肌肉层。肝脏体积进一步增大,肝血窦增多。29dpb鱼体胃壁形成大量胃腺,肌肉层增厚,胃壁结构层次明显,肠腔显著扩大,纵行褶皱增多,肝细胞排列紧密,胰腺细胞团状排列,此时消化系统接近于成体。视觉器官在早产仔鱼中发育不完善,晶状体体积小,视网膜分化不完善。1dpb仔鱼的眼球发育已较为完善,16dpb仔鱼眼球外围出现肌肉纤维,眼球转动更灵敏,24dpb眼的各个部分发育接近幼鱼。呼吸器官的胚后发育主要为鳃弓、鳃丝和鳃小片的生长分化。
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