陕西省线辣椒植原体的分子检测及其与泡桐植原体的同源性分析

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辣椒(Capsicum annuum L.),属于茄科辣椒属,又名辣子、海椒、番椒、辣茄等,在中国是继白菜之后的第二大蔬菜作物。辣椒在世界蔬菜作物中也是具有非常重要的位置,是世界第三大蔬菜作物。陕西特色的线辣椒丛枝小叶病是一种发病率高,对产量和质量影响巨大的病害。针对丛枝小叶病的研究对于生产中的病害防治具有指导作用。为给线辣椒丛枝小叶病的有效防治提供参考依据,分别于2012年和2013年在陕西线辣椒主产区(宝鸡、咸阳、渭南)的十多个县(市)采集92和86个线辣椒丛枝小叶病病叶样品,采用植原体16S rRNA的通用引物p1/p7和R16F2n/R16R2对病叶进行巢式PCR分析。2012年的分析结果表明,以P1/P6和R16F2/R16R2,R16mF2/R16mR1和R16F2/R16R2,P1/P7和R16F2/R16R2三种引物组合对92个线辣椒疑似植原体病株及对照百慕大草白叶病株样品的16SrRNA基因进行巢式PCR扩增。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,只有P1/P7和R16F2/R16R2引物组合在16个线辣椒疑似植原体病株及对照百慕大草白叶病株样品中扩增出了目标片段,其余两种引物组合只在对照百慕大草白叶病株样品中扩增出了目标片段。将用P1/P7和R16F2/R16R2引物对扩增到的目的片段进行测序分析后发现,所扩增到的目的片段为芽孢杆菌的16SrRNA基因片段,即在检测疑似病株植原体的过程中出现的是假阳性现象;2013年在采自宝鸡地区凤翔县淡村的2个线辣椒病株样品中扩增出了 1 246 bp的植原体目的片段,在其余84个病株样品中也没有扩增出植原体。2013年对同时采集的泡桐和车前草样品采用同样的引物和方法进行PCR分析,同样检测出了植原体。测序分析结果,线辣椒和车前草中的植原体与泡桐丛枝植原体的同源性在99%以上,均属于16SrI组。通过电镜观察,在扩增出植原体目的片段的线辣椒病株茎杆韧皮部观察到少量植原体细胞。上述结果表明,植原体不是引起陕西线辣椒丛枝小叶病的主要病原物;线辣椒是泡桐丛枝植原体的自然寄主。
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