论文部分内容阅读
目的： 1.寻找可靶向结合肾母细胞瘤抑制基因1（WT1）的潜在miRNA，并阐明其结合WT1后的效应； 2.研究miR743a对后肾间充质细胞增殖、凋亡能力的影响。 方法： 1.应用荧光素酶报告分析实验，分析miR743a靶向结合WT1的3UTR的能力； 2.应用荧光定量PCR分析及免疫印迹实验，比较抑制WT1上miR743a结合位点前后WT1在mRNA和蛋白水平的表达变化； 3.应用EDU增殖实验及WT1 rescue实验，研究miR743a对后肾间充质细胞增殖能力的影响； 4.应用细胞凋亡实验及WT1 rescue实验，研究miR743a对后肾间充质细胞凋亡能力的影响； 5.所有的样品检测三次。所有的结果均为平均值±SD和进行配对t检验。我们使用GraphPad Prism5软件（GraphPad，圣地亚哥，CA， USA）进行数据分析，得到柱状图。 P<0.05有统计学意义。 结果： 1. miR743a可靶向结合WT1的3UTR； 2. miR743a可显著抑制WT1在mRNA和蛋白水平的表达； 3. miR743a可在MM细胞中表达，并通过靶向结合WT1调控后肾间充质细胞的增殖及凋亡； 结论： 1. miR743a转录后水平靶向调控WT1; 2. miR743a可影响后肾间充质细胞增殖凋亡。