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侵袭和转移是恶性肿瘤特征之一，也是口腔癌患者致死的主要原因。越来越多的研究表明，上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)与恶性肿瘤的发展密切相关。膜型基质金属蛋白酶-1(Membrane Type1MatrixMetalloproteinase, MT1-MMP)是一种以活性形式表达在细胞表面上的蛋白酶，被认为是影响细胞周围微环境的因子之一，参与降解细胞外基质组成成分从而促进肿瘤侵袭和细胞迁移。目的：探讨MT1-MMP在诱导口腔癌细胞EMT及促其侵袭转移过程中的作用机制。方法：首先，构建pEGFP-N1-MT1-MMP真核表达质粒；通过细胞转染的方法，获得稳定表达细胞株SCC9-N（对照组）及SCC9-M（实验组）；通过实时定量PCR、免疫蛋白印迹技术、免疫荧光显微方法检测上皮和间质标志物的表达改变，观察细胞的形态学变化；应用粘附实验、侵袭实验、划痕实验检测细胞生物学特性的改变。其次，通过细胞流式仪、MTT及单克隆形成实验检测发生EMT之后的细胞是否获得肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)样的特性。最后，通过慢病毒干扰载体转染细胞，下调口腔癌细胞中MT1-MMP的表达水平，进一步检测MT1-MMP对口腔癌细胞侵袭能力的影响。结果：成功构建pEGFP-N1-MT1-MMP真核表达质粒；过表达MT1-MMP诱导SCC9发生了明显的EMT，细胞呈细长的成纤维细胞样形态，上皮标志物E-cadherin， cytokeratin18和β-catenin表达下降，而间质标志物vimentin和fibronectin的表达明显上升；MT1-MMP所诱导的细胞形态改变增加了转录抑制因子Twist和ZEB的表达并且是通过抑制E-cadherin的转录，使细胞粘附能力减弱而侵袭能力增强。MT1-MMP不仅诱导SCC9细胞发生了EMT，同时使其获得了CSCs样的特性，增殖能力减弱，但能够形成新的单克隆仍具有自我更新能力，CSCs表面标记物CD24表达降低，对化疗药物具有一定的抗性和抗凋亡特性。通过慢病毒干扰载体转染细胞，下调SCC25中MT1-MMP的表达后导致MMP-2、MMP-9和MMP-13表达均下降；同时，过表达MT1-MMP的SCC9细胞中MMP-2，MMP-9和MMP-13的表达均上升。以上结果说明口腔癌细胞中MT1-MMP可调控MMP-2，MMP-9和MMP-13的表达。另外，下调MT1-MMP使侵袭能力较强的SCC25细胞侵袭能力减弱；相反的，过表达MT1-MMP使SCC9细胞获得了较强的侵袭能力，说明MT1-MMP可增强口腔癌细胞侵袭能力。结论：本实验证实过表达MT1-MMP诱导口腔癌细胞发生EMT进而促其侵袭转移，并且使其获得CSCs样的特性。MT1-MMP通过调控MMP-2，MMP-9和MMP-13的表达从而影响口腔癌细胞的侵袭能力。这些有关MT1-MMP分子功能的相关研究，有可能为口腔癌的临床治疗提供新的靶点。