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目的:运用临床流行病学调查研究方法,探讨自然流产患者中医证型及临床症状分布规律;运用卵泡液(follicular fluid,FF)代谢组学技术分析体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)肾阳虚型不明原因复发性流产(Unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)患者与正常分娩者FF组分,探讨URSA发生机制,辨识并确定与肾阳虚型URSA发生密切相关的差异性化合物,探讨URSA患者FF代谢标志物与中医肾阳虚证的相关性,以期为科学预测和诊断URSA肾阳虚证、探讨其证候本质做初步尝试。方法:采用临床流行病学调查研究方法,收集2016年1月至2017年7月就诊于山东中医药大学附属医院生殖与遗传中心的264例自然流产患者的中医四诊资料,建立数据库,分析自然流产患者中医证型及临床症状分布规律。在第一部分研究的基础上,采用回顾性观察性研究方法,收集2016年5月至2017年2月于本中心行IVF-ET患者(因输卵管因素行试管婴儿)的FF,分为对照组(分娩者)40例和流产组(肾阳虚型URSA者)32例,利用超高效液相色谱-高分辨质谱技术分析两组的FF,采用主成分分析法(PCA)和偏最小二乘法-判别分析法(PLS-DA)对数据进行处理,分析对照组和流产组FF差异代谢物,探讨URSA患者FF代谢标志物与中医肾阳虚证的相关性。结果:流行病学调查结果:1.264例自然流产患者中,肾虚证共196例(占74.24%),是自然流产患者最主要的中医证型,肾阳虚证是肾虚证最常见的分型。肾阳虚证47例(占总数17.80%),肾气虚证和肾阴阳两虚证,均为40例(占15.15%),肝郁肾虚证28例(占10.61%),肾虚血热证17例(占6.44%),肾阴虚证14例(占5.30%),肝郁证11例(占4.17%),血热证7例(占2.65%),肾虚血瘀证6例(占2.27%),血瘀证5例(占1.89%),肝郁肾虚血热证与气血虚弱证各3例(占1.14%),脾肾阳虚证、气阴两虚证各1例(占0.38%)。2.264例自然流产患者最常见的症状为腰膝酸痛,疲倦乏力、急躁易怒等也较为常见。实验研究结果:1.流产组与对照组共计32种差异化合物,包括氨基酸类:缬氨酸(L-valine)、6-氧代己酸酯(6-Oxohexanoate)、酮戊二酸(2-Oxoglutarate)、亮氨酸(L-Leucine)、苯丙氨酸(L-Phenylalanine)、色氨酸(Tryptophan);脂肪酸类:亚油酸(Linoleate)、油酸(Oleic acid)、二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid)、棕榈酸(Palmitic amide);胆酸类:石胆酸(Lithocholic acid)、甘氨鹅脱氧胆酸钠(Chenodeoxyglycocholate)、羟基胆甾烷(Trihydroxy-5beta-cholestan-26-al);维生素类:25-羟维生素D3(25-Hydroxyvitamin D3)、13-羟基-α-生育酚(13’-hydroxy-alpha-tocopherol);溶血卵磷脂类:LysoPC(16:0),LysoPC(18:0),LysoPC(18:1),LysoPC(18:2),LysoPC(18:3),LysoPC(20:3),LysoPC(20:4),LysoPC(20:5);其他类:棕榈酰甘油磷酸胆碱(Palmitoylglycerophosphocholine)、胆红素(Bilirubin)、棕榈醛(Hexadecanal)、二氢视黄醇(13,14-Dihydroretinol)、硫酸脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone sulfate)、羟基胆甾醇(Hydroxycholesterol)、硬脂酰肉毒碱(stearoylcarnitine)。2.差异化合物中 Dehydroepiandrosterone sulfate,LysoPC(16:0),LysoPC(18:1),LysoPC(18:2),LysoPC(18:3),LysoPC(20:3),LysoPC(20:4),Palmitoylglyce rophosphocholine 在肾阳虚型 URSA 患者 FF 中的表达上调,L-valine,6-Oxohexanoate,L-Phenylalanine,2-Oxoglutarate,Linoleate,Oleicacid,Docosahexaenoic acid,13,14-Dihydroretinol,Lithocholic acid,stearoyl-carnitine,25-HydroxyvitaminD3,Hydroxycholesterol,Chenodeoxyglycocholate,T rihydroxy-5beta-cholestan-26-al,13’-hydroxy-alpha-tocopherol,Tryptophan,L ysoPC(18:0),LysoPC(20:5),Bilirubin 等的表达均下调。结论:1.临床流行病学调查显示自然流产患者中医证型以肾虚证为主,肾阳虚证为肾虚证的主要分型,这与中医学“肾主生殖”理论相吻合。2.自然流产患者最常见的症状为腰膝酸痛,急躁易怒等症状的出现频率增加,可能与当前生活方式改变有关。3.FF代谢组学分析显示氨基酸类、脂肪酸类、维生素类、胆固醇类等的表达下调与肾阳虚证存在相关性。溶血卵磷脂类、酰胺类、硫酸脱氢表雄酮在肾阳虚型URSA患者FF中的表达显著上调,可能与肾阳虚证存在一定相关性,但尚需进一步研究。4.研究鉴定的特征性化合物为肾阳虚型URSA提供可能的诊断依据和治疗靶点,从FF代谢组学层面为肾阳虚型URSA证候学提供科学依据。