人纤溶酶是人体血液中的具有溶解多种蛋白作用的酶,在体内多种正常及病理状态发挥作用。现已有研究表明,人纤溶酶不但可以降解纤维蛋白,其与其酶原形式也可直接作用于白细胞,参与免疫调节。目前已证实人纤溶酶及人纤溶酶原可影响巨噬细胞极化作用及促进中性粒细胞凋亡和胞葬作用。但天然人纤溶酶及其酶原来源有限,仅能从人血浆中纯化分离。且由于其分子量较大,分子结构复杂,难以重组表达。但人纤溶酶原的丝氨酸蛋白酶结构域(Plasminogen Serine Protease Domain,Plg-SP)被激后可保留完整的人纤溶酶活性,且分子量小,结构相对简单。故本文利用毕赤酵母表达系统构建表达了人纤溶酶原的丝氨酸蛋白酶结构域,并对其对巨噬细胞极化的影响做了初步探究。本文利用基因工程方法,使用X33组成型毕赤酵母表达菌株构建表达了人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶结构域。并通过亲和层析纯化得到纯度为97%的蛋白样品,样品经鉴定为构建蛋白,且浓度为0.53mg/ml,为后续研究提供了满足需要的蛋白样品。本文就人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶结构域对两种来源巨噬细胞极化的影响做了初步探究。研究发现,经Plg-SP蛋白刺激后,鼠源巨噬细胞RAW264.7及人源巨噬细胞MV-4-11中M2型巨噬细胞表面标志物Arg-1和CD206基因表达水平明显升高,而M1型巨噬细胞表面标志物iNOS基因表达水平显著降低。初步的研究表明,Plg-SP可影响巨噬细胞向M2方向极化。