应用胶原膜缓解大鼠跟腱损伤修复中肌腱粘连的实验研究

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目的肌腱粘连是肌腱手术后最常见的致残原因之一。预防肌腱粘连是肌腱修复手术后面临的一个重大挑战。本实验旨在利用大鼠跟腱损伤模型,研究在手术修复损伤肌腱中应用胶原膜包裹受损肌腱对肌腱愈合强度、愈合质量以及预防肌腱粘连发生的作用,探讨其临床运用的可行性。方法切断60只雄性Sprague-Dawley大鼠(250±18克)双侧后肢跟腱共120条,改良Kessler’s法进行手术缝合。按随机对照原则分为空白对照组(G1,切开皮肤分离软组织但未切断肌腱,n=40)、手术组(G2,肌腱切断后单纯缝合,n=40)、胶原膜治疗组(G3,肌腱切断,手术缝合并包裹胶原膜,n=40)。每组随机分为2组,分别于术后四周及八周处死大鼠,取得肌腱,进行大体观察评价、生物力学评价、组织学切片HE染色及免疫组织化学方法染色分析。结果大体观察评价分析显示胶原膜治疗组比手术组肌腱粘连程度显著降低。生物力学测试结果显示:术后4周,手术组与胶原膜治疗组肌腱平均最大张力比对照组降低(p<0.05),但胶原膜治疗组相比手术组增高(p <0.05)。术后8周,胶原膜治疗组的最大张力相比手术组增高(p <0.05),胶原膜治疗组的最大张力与对照组无显著性差别(p>0.05)。HE染色组织学观察结果:术后4周,手术组见瘢痕组织。胶原膜治疗组肌腱胶原纤维束排列不规则,但更密集,且线性排列方式优于手术组。术后8周与术后4周相比,手术组和胶原膜治疗组的修复更成熟,胶原蛋白基质更密集,胶原纤维束规则排列,总胶原基质的面积更宽。术后8周,胶原膜治疗组的胶原基质总面积超过手术组。术后8周在手术组部分区域发现有骨化形成。Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色结果显示:术后8周胶原膜治疗组和手术组Ⅰ型胶原的表达均略强于相应组术后四周;术后4周和8周,胶原膜治疗组分别都比相应手术组有显著强表达的Ⅰ型胶原蛋白(p <0.05)。手术组在术后4周或8周都可观察到Ⅱ型胶原的棕色染色,但在术后8周时较多。术后4周和8周的Ⅱ型胶原表达,胶原膜治疗组均比手术组弱(p<0.05)。结论用胶原膜包裹损伤肌腱相比于无包裹的损伤肌腱愈合更好,粘连程度降低。
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