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目的 室管膜是衬覆在脑室内面的单层纤毛立方上皮,是脑-脑脊液屏障,血-脑脊液屏障的主要组成部分,在脑脊液的产生,脑内信息的转导,维护脑的微环境等方面具有重要的作用,也是脑内给药和脑疾病治疗新途径开发关注的焦点之一;室管膜在一些部位可能是由于功能的需要其细胞和组织结构发生了特化,在二十世纪五十年代人们将这些特化的室管膜称为室周器官。在哺乳动物,目前被公认的室周器官有穹隆下器,终板血官器,正中隆起,连合下器,松果体隐窝,旁室器官(位于第三脑室侧壁的中央,前连合和乳头体后缘的连线上,室管膜细胞呈多层排列,室管膜下层神经胶质细胞较少,神经细胞的树突穿过室管膜细胞之间,直接突入脑室中),最后区等。但有人把神经垂体,松果体,脉络丛等也列为室周器官。在鱼类还有血管囊(位于神经垂体的紧后方,漏斗茎的后端。该处的室管膜细胞由王冠细胞和支持细胞构成)和脊髓尾部垂体(位于脊髓尾部中央管腹侧,呈半球形的一个隆起,Urophyse)。以及鸟类的腰髓隆起(位于腰骶髓后正中沟中,含有大量的糖元和明胶样组织块,Lumbalwulst)。目前,人们对室管膜以及由室管膜特化形成的室周器官的功能认识的还很浮浅,在二十世纪九十年代以前,对室周器官维持内环境稳定的神经内分泌调节功能研究很多;在二十世纪九十年代以后,开始关注室周器官在神经免疫调节中的作用。而有关室管膜上细胞,室管膜上纤维以及接触脑脊液神经元在神经体液调节以及神经-内分泌-免疫调节网络中的作用,目前越来越受到人们的重视,由于室周器官处于血液-神经-脑脊液三种信息流的交汇处,特殊的位置决定了它在神经-内分泌-免疫调节中可能起着举足轻重的作用。所以,本文对第四脑室外侧隐窝,第三脑室的正中隆起,在幼年,成年,老年动物上用光镜,电镜进行了系统的研究。 材料与方法正常SD雄性大鼠,分幼年组,成年组,老年组,用光镜,扫描电镜,透射电镜进行实验。光镜样品的制备:动物腹腔内注射 中文摘要6%水合氯醛(0.5ml/1009体重)麻醉,经心灌注37’C生理盐水50-100ml,再灌注4%多聚甲醛m.IM,pH7.2)磷酸缓冲液100400m,30分钟灌注完毕,取出整脑,在上述固定剂*oC)内后固定12小时。切取观察部位脑块,然后,进行梯度酒精脱水,浸蜡,包埋,修块,石蜡连续切片 (德国LEICA石蜡切片机人 切片厚度still,Zlllll,蛋自甘油载片捞片,60C烤箱过夜,二甲苯脱蜡,梯度酒精置换,浸水,H六染色,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树脂封片。室温风干后,显微镜观片,OLYMPUS万能显微镜照相。扫描电镜样品的制备:动物腹腔内注射6%水合氯醛 (0.5ml/1009体重)麻醉,经心灌注37oC生理盐水50一100。1,再灌注4%多聚甲醛和 2.5%戊二醛(0.IM,pH7.2)磷酸缓冲液 100 一400*1,30分钟灌注完毕,取出整脑,在上述固定剂KoC)内后固定12小时,切取观察部位脑块,将切块收入0.IM、pH7.2磷酸缓冲液中过夜后,再用上述磷酸缓冲液冲洗切块三遍,然后梯度酒精脱水,醋酸乙戊酯置换,二氧化碳临界点干燥,真空喷金,日历S七500N观察、照像。透射电镜样品的制备:动物腹腔内注射 6%水合氯醛门.sml/100g体重)麻醉,经心灌注37℃生理盐水100M,再灌注49多聚甲醛和2.5%戊二醛①.IM,pH7.2)磷酸缓冲液350ml,30分钟灌注完毕,取出整脑,在上述固定剂NC)内后固定12小时,经正中线切开整脑,从背侧去除小脑,暴露出第四脑室底,切取外侧隐窝人日处脑块3X3XZn,磷酸缓冲液冲洗三次,梯度酒精脱水,环氧树脂浸透包埋,超薄切片,日历透射电镜观察,照相。 结果1.大鼠第四脑室外侧隐窝扫描电镜观察 a人 室管膜上结构:本研究系统的观察了大鼠第四脑室底外侧隐窝的室管膜,发现在外侧隐窝入曰处,与邻近的室底相比为一少纤毛区,有较多的室管膜上结构,纤毛稀疏或缺如,在纤毛稀疏区内可以观察到分布疏密程度不一的微绒毛,该区域的面积为 200十00 o\室管膜上纤维有两种类型,一种纤维粗细不匀,长短不一,多交织成网状。另一种纤维,呈圆柱状,粗细均匀,直径0.10.spe长度30千0po,纤维之间无交织现象;室管膜上细胞可见两种类型,一种吞噬细胞样细胞,具有放射状的突起,被盖于纤毛簇的上方,此种细胞胞体圆形或椭圆形,直经8l6 w,表面光滑,该类细胞突起较多,每一细胞皆有6l 个,且从胞体呈放射 2 中文摘要 状发出,突起呈圆柱状,根部粗大,多有分枝,末梢尖细,且贴附于室 管膜表面。突起的长度多为 20ed0 o。另一种室管膜上细胞为神经元样 细胞,该类细胞的胞体呈圆形或椭圆形,直径 810 o,表面凹凸不平, 且多有圆形或椭圆形分泌颗粒,颗粒直径0.5l.spe,该类细胞的突起 较少,每个细胞多有卜 个,突起呈圆柱状,且根部与末梢粗细一致, 直径 0.3个.6 w,突起长度 5