本论文将考马斯亮蓝法(Bradford)中常用的考马斯亮蓝染料引入到基于SERS的蛋白质研究中,建立了几种基于考马斯亮蓝SERS的蛋白质检测方法,包括蛋白质浓度测定,免疫检测和蛋白质与小分子相互作用检测。主要创新性研究成果如下:(1)利用SERS发展了常规的蛋白质浓度检测技术考马斯亮蓝法,通过SERS检测而不是传统的吸收测试实现了对蛋白质浓度的高灵敏度检测。该方法检测限可以达到1 ng/mL,比传统考马斯亮蓝法低200倍,并且可以在很宽的线性浓度范围内确定蛋白质浓度,比传统的考马斯亮蓝法或其它常见蛋白浓度测定方法都要宽。(2)利用考马斯亮蓝染料分子易与蛋白质结合的特点建立了一种简便快速的蛋白质标记方法,标记过程不需要加入额外试剂,加入过量BSA即可封闭游离的染料分子使标记后无需进一步纯化。并且,这种标记方法除了可以在溶液中操作,在固相基底上也可以同样方便地进行。(3)考马斯亮蓝标记的蛋白质与修饰有配体的金属纳米粒子通过生物识别作用引起聚集,进而开启了标记分子的电磁增强得到其SERS。应用这个原理我们实现了对蛋白质-蛋白质之间和蛋白质-小分子之间相互作用的高灵敏度检测。