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目的本研究通过建立铅暴露大鼠模型,初步筛查大鼠海马中变化的关键铜相关蛋白质;通过检测铜相关蛋白CD200及其受体CD200R蛋白的表达情况,探讨CD200和CD200R蛋白在铅暴露致大鼠海马炎症中的作用,本研究将为铅神经毒性机制及预防的研究提供理论依据。方法SPF级SD雄性健康大鼠45只,随机均分为对照组、低铅暴露组、高铅暴露组,每组15只。采用自由饮水的方式染毒,低铅暴露组给予0.25 g/L乙酸铅,高铅暴露组给予0.5 g/L乙酸铅,对照组给予等量双蒸水,连续染毒20周;应用Morris水迷宫实验检测实验大鼠的空间记忆和学习能力;应用HE染色法观察实验大鼠海马组织病理学变化;应用ICP-MS测定实验大鼠海马中铅、铜元素的含量;应用Cu-IMAC技术分离实验大鼠海马中铜相关蛋白质组;利用iTRAQ联合LCESI-MS/MS技术鉴定和分析铜相关蛋白质组;采用Western Blot技术检测实验大鼠海马中铜相关蛋白CD200及其受体CD200R蛋白的表达;应用激光扫描共聚焦显微镜观察CD200和CD200R蛋白的表达;采用Western Blot技术检测实验大鼠海马中Iba1、IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ蛋白的表达。结果1 Morris水迷宫测试结果显示,低铅暴露组和高铅暴露组大鼠的逃逸潜伏期显著增加,且穿台次数显著下降(P<0.05)。2 HE病理观察可见,随着染毒剂量增加,大鼠海马神经元细胞损伤也愈加严重,表现为神经元细胞排列紊乱,细胞数目减少,细胞核深染。3与对照组大鼠海马的铅、铜的含量(0.015±0.007)μg/g、(1.58±0.11)μg/g相比,低铅暴露组和高铅暴露组显著增加(P<0.05),分别为(0.40±0.05)μg/g、(1.31±0.17)μg/g和(2.04±0.42)μg/g、(2.50±0.48)μg/g。4蛋白质组学检测结果显示,大鼠海马组织中共分离鉴定出3641个铜相关蛋白,其中铅暴露后差异的铜相关蛋白共108个,包括65个上调蛋白,43个下调蛋白,其中CD200蛋白下降倍数最多,为对照组的53%。5低铅暴露组和高铅暴露组大鼠海马CD200的蛋白表达分别是对照组的69%和59%,高铅暴露组CD200R蛋白表达为对照组的53%(P<0.05);与低铅暴露组相比,高铅暴露组CD200和CD200R的蛋白表达也显著下降(P<0.05),CD200和CD200R的荧光强度减弱。6与对照组比较,高铅暴露组大鼠海马中Iba1蛋白表达量均明显增加,是对照组和低铅暴露组的3.33倍和2.27倍(P<0.05)。低铅暴露组和高铅暴露组大鼠海马中IL-6、L-1β和TNF-α的蛋白表达比对照组分别增加了21%和35%,78%和112%,16%和58%(P<0.05);高铅暴露组IL-1β和TNF-α的表达高于低铅暴露组。与对照组相比,低铅暴露组和高铅暴露组大鼠海马中IFN-γ的蛋白含量分别降低了21%和42%(P<0.05),且高铅暴露组低于低铅暴露组,差异有统计学意义。结论铅暴露可引起大鼠海马差异铜相关蛋白表达谱的改变,加剧炎症损伤;铜相关蛋白CD200及其受体CD200R可能在铅致神经炎症的过程中发挥重要作用。图13幅;表6个;参146篇。