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烟草中含有绿原酸、芸香苷(芦丁)、烟碱和茄尼醇等多种生物活性成分,这些活性成分经提取纯化后有望用于农业、医药、食品、化工等诸多行业。绿原酸具有抗病毒、抗菌、保肝利胆等多种药理作用;芦丁在医药和食品领域作为心血管保护药物及食品中的抗氧化剂等。本工作以废弃烟草为研究对象,对绿原酸的提取和纯化工艺进行了研究,同时提取分离芦丁,相关内容如下:(1)研究了超声波辅助提取烟草中主要药用成分绿原酸的工艺。通过对溶剂种类、浓度、提取时间及温度等因素的试验,确定了适宜的提取条件,在95%乙醇,50℃,60min,pH4和料液比1:10(w:v)的条件下,绿原酸的提取率为92.57%,比较了石油醚萃取与超临界C02萃取去除烟碱的效果,结果表明石油醚萃取对烟碱的去除率为45.5%,对浓缩液还有脱脂的效果。(2)研究了聚酰胺柱层析分离绿原酸的工艺。采用80-100目的聚酰胺材料,在上样液中绿原酸浓度为10mg/mL时,用4BV30%的乙醇洗脱,所分离的绿原酸纯度为27.7%(收率33.8%);经聚酰胺柱二次分离,绿原酸产品纯度提高到40.7%(收率为49.5%),同时分离出另一种多酚物质,通过热水重结晶精制,经红外光谱和其他方法鉴定,确定为芦丁(纯度94.8%)。(3)采用乙酸乙酯萃取对绿原酸粗品进一步富集分离,使用绿原酸浓度12 mg/mL的料液,经1:3(v:v)体积比萃取2次,萃取得到的绿原酸样品纯度为62%(萃取率72%)。(4)采用常压硅胶柱层析对纯度为62%的绿原酸样品进行精制,在物料比1:30条件下得到纯度为78.2%的绿原酸产品。结合LC-MS技术,1HNMR技术对该绿原酸组成进行分析,结果表明绿原酸(5-CQA)是主要成份(占总绿原酸量的78.2%),同时还存在新绿原酸(3-CQA,1.9%)、隐绿原酸(4-CQA,10.1%)和cis-5-CQA(2.0%)三种绿原酸的同分异构体。通过后续实验的分离,在物料比为1:50的条件下得到更高纯度的绿原酸产品,其中5-CQA含量为89.3%,4-CQA含量为8.4%。