石上柏作为一种抗癌药用植物受到广泛关注。体内外研究发现,石上柏主要抗癌活性成分为总双黄酮类成分。我们前期研究发现,石上柏总双黄酮提取物在水中的溶解度小,其体内溶出速率低、生物利用度较差。固体分散体技术是提高溶解度、改善生物利用度的有效手段。因此,本文开展石上柏总双黄酮的固体分散体制剂研究,提高其溶解度和溶出度;并对固体分散体制剂进行质量标准研究;此外,还对固体分散体进行体内抗癌药效研究。通过上述研究,以期为石上柏总双黄酮的药物制剂开发奠定基础。本文的研究内容及贡献如下:(1)石上柏总双黄酮固体分散体的制备工艺研究首次对石上柏总双黄酮固体分散体的制备工艺进行研究。研究PEG-6000、PEG-4000、F68和PVP-K30等载体,采用溶剂-熔融法和溶剂法制备固体分散体,选择最佳载体;随后,以体外溶出度为指标,考察最佳载体PVP-K30与总双黄酮的最佳质量比和溶出介质;通过正交试验对固体分散体制备工艺进行优化。此外,对固体分散体的基本性质(溶解度、在不同溶液中的稳定性、油水分配系数等)进行考察,并进行物性分析(DSC测定和红外光谱分析等)。最终优化工艺结果为:称取质量比为1:5的石上柏总双黄酮提取物与PVP-K30,分别用适量无水乙醇溶解后,将总双黄酮提取物溶液缓慢滴入载体PVP-K30溶液中,超声20 min使其充分混合,于60℃恒温旋蒸,除去乙醇,50℃真空减压干燥,粉碎过80目筛,置干燥器中备用。总双黄酮制备成固体分散体后在水中的溶解度由原来的87.22μg/mL提高到1.50 mg/mL,DSC测定和红外光谱分析结果表明该固体分散体以无定形态存在。(2)固体分散体的胶囊及质量标准研究对研究制备的固体分散体,测定其休止角和堆密度;将固体分散体采取直接填装法制备固体分散体胶囊;对固体分散体胶囊进行质量标准研究,包括性状、鉴别(UV和HPLC鉴别)、检查(水分和溶出度)和含量测定(UV法测定固体分散体胶囊中总双黄酮的含量,HPLC测定总双黄酮成分之一Delicaflavone的含量)等内容;此外还通过影响因素试验和加速试验,对固体分散体胶囊的稳定性进行考察。休止角测定结果(38.95°)表明,所制备的固体分散体流动性好,适宜直接填装胶囊。质量标准研究中制定了完善的分析方法,水分、溶出度测定均符合药典的技术规定要求;HPLC测定Delicaflavone含量,精密度、准确度及重现性好;UV测定总双黄酮的含量和溶出度,方法准确度高、简便可靠,易于操作。稳定性试验结果表明石上柏总双黄酮固体分散体胶囊在光照、高温、高湿和加速实验条件下质量稳定。(3)石上柏总双黄酮固体分散体的体内药效学研究建立人肺癌A549细胞荷瘤裸鼠模型,对石上柏总双黄酮固体分散体的体内药效进行考察。灌胃给予低、中、高不同的剂量(以总双黄酮计分别为100、200、300 mg/kg),观察该制剂对A549移植瘤的体积、重量、微血管密度等的影响。结果表明,不同剂量的总双黄酮固体分散体对荷瘤裸鼠的肿瘤抑制作用呈剂量依赖关系,高剂量组作用最为明显,抑制率达到59%;中剂量组抑制率为52%,与阳性组(阿霉素)相当;低剂量组抑制率为28%,其高剂量和中剂量瘤体重量与阴性组比较有显著性差异(P<0.05)。HE染色结果显示高剂量和中剂量给药组出现肿瘤组织坏死;CD34血管密度测定结果表明各给药组肿瘤组织微血管密度下调,且呈剂量依赖关系,高剂量和中剂量与阴性组相比有显著性差异(P<0.05)。本文成功制备了石上柏总双黄酮的固体分散体,较大程度的改善了其溶解度和溶出度;所制备的固体分散体流动性好,适宜直接填装制备胶囊;质量标准及稳定性研究表明,石上柏总双黄酮固体分散体胶囊质量可控、稳定性好,适宜工业生产;此外,本文所制备的石上柏总双黄酮固体分散体具有较好的体内抗肿瘤作用。上述研究为石上柏总双黄酮的抗癌药用开发奠定了制剂基础。