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目的:多发性硬化(Multiple Sclerosis, MS)是一种慢性的中枢神经系统(central nervous system, CNS)自身免疫性炎性脱髓鞘性疾病。目前,MS的发病机制仍不十分清楚,国内外学者多倾向于T淋巴细胞免疫机制方面的研究,认为由T细胞介导的免疫反应是导致急性MS病变的主要始动因素,但也有少数学者认为B淋巴细胞的免疫反应在MS的发病中同样起到了重要的作用。最新研究表明,MS患者脑脊液中存在由B细胞克隆扩增所产生的特异性自身免疫性抗体,而其中3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)反应性抗体的特异性较高。本研究的主要目的:1.检测MS患者脑脊液中GAPDH反应性抗体的表达水平;2.比较MS患者与非MS的其它中枢神经系统疾病患者脑脊液中GAPDH反应性抗体的表达水平的差异;3.探讨MS患者脑脊液中GAPDH反应性抗体表达水平与其性别、年龄及临床EDSS评分的相关性。方法:选取23例符合2010年McDonald诊断标准的MS患者作为MS组并记录临床EDSS评分,另选取30例年龄、性别与MS组相匹配的非MS的中枢神经系统疾病患者作为非MS组,其中包括17例其它炎症性的中枢神经系统疾病患者作为OIND组,以及13例其它非炎症性的中枢神经系统疾病患者作为ONIND组。所有入选者均于入院2日内在患者及家属知情同意下行腰椎穿刺术(患者未经糖皮质激素或者静注人免疫球蛋白等药物治疗),留取脑脊液约3ml(有明确出血污染者弃之),分组进行标记,冻存于-80℃冰箱中待检。标本收集完成后,购买相应试剂,采用ELISA间接法检测各组标本中GAPDH反应性抗体的表达水平,并于450nm波长处测定各组标本的OD值,每个标本测量3次,取平均值为最终结果。最后应用SPSS13.0软件对检测结果进行统计学分析,比较各组间OD值有无统计学差异,并以ONIND组OD值的均数加两倍的标准差为临界值(the cut-off level),计算各组脑脊液中GAPDH反应性抗体的表达水平有所升高的阳性率并进行比较。若统计结果显示脑脊液中GAPDH反应性抗体的表达水平在MS组较在ONID组及ONIND组均有所升高,则对MS患者脑脊液中GAPDH反应性抗体表达水平与患者的性别、年龄、临床评分进行相关性分析。结果:1ELISA结果ELISA结果可见:于450nm波长处, MS组OD值波动于0.7246-0.8473,平均为0.7865±0.0376; OIND组OD值波动于0.6953-0.8357,平均为0.7522±0.0354; ONIND组OD值波动于0.7042-0.8265,平均为0.7578±0.0395。经检验,所测各组OD值均为正态分布,应用两独立样本t检验方法进行检验,取α=0.05,即P<0.05有统计学意义,结果显示脑脊液中GAPDH反应性抗体表达水平在MS组与OIND组及ONIND组中差别有统计学意义,P值分别为0.006及0.038。以ONIND组OD值的Mean+2SD为临界值(the cut-off level),所测OD值大于临界值的标本认为存在脑脊液中GAPDH反应性抗体表达水平的升高。可得脑脊液中GAPDH反应性抗体水平有所升高的例数为:MS组2例,8.7%;OIND组0例,0%;ONIND组0例,0%。2MS患者脑脊液中GAPDH抗体表达水平与临床指标的关系经检验,各样本值均为正态分布,应用两独立样本t检验方法进行检验,MS组患者脑脊液中GAPDH抗体表达水平在男、女患者中无明显差异(F=2.184,P=0.103)。应用Spearman相关分析法进行分析,MS组患者脑脊液中GAPDH抗体表达水平与患者年龄(r=-0.197,P=0.367)无相关性;与临床EDSS评分(r=0.327,P=0.127)无相关性。结论:MS患者脑脊液中GAPDH反应性自身抗体表达水平有所升高,并且与OIND患者及ONIND患者相比差异有统计学意义,GAPDH的免疫反应性在MS患者中有所升高,这说明GAPDH在我国MS患者发病过程中也可能作为一种轴突自身免疫性抗原而发挥作用,为今后我国学者对于MS免疫学机制的研究提供了新的方向。脑脊液中GAPDH抗体的检测可能作为一种辅助手段而应用于临床诊断MS。MS患者脑脊液中GAPDH抗体的表达水平在不同性别中无明显差异,与年龄及临床EDSS评分无相关性。