麦麸阿魏酰聚糖对大鼠抗氧化功能的影响及其作用机制

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:bjiyguang
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本论文通过三个部分试验旨在研究麦麸阿魏酰聚糖(feruloylated saccharides,FSs)体外抗氧化能力、对大鼠抗氧化功能的影响及其作用机制。1.阿魏酰聚糖体外抗氧化活性评价通过Amberlite XAD-2和Sephadex LH-20柱获得纯度较高的麦麸阿魏酰聚糖,通过测定还原力、DPPH自由基清除能力和羟基自由基清除能力评价其体外抗氧化能力。经紫外光谱扫描可知,阿魏酰聚糖在325 nm有吸收峰;红外光谱分析表明,阿魏酰聚糖中含有羟基、酯键及β-型糖苷;麦麸FSs具有良好的还原力,且存在剂量效应,是未处理原料的2.24倍;麦麸FSs对DPPH自由基具有强烈的清除作用,浓度为2 mg/mL时DPPH自由基清除率可达到91.10%,相当于人工合成抗氧化剂BHA的效果;麦麸FSs对羟基自由基的清除率随着浓度的升高而提升,浓度为4mg/mL时清除率达33.30%,显著高于未处理原料。2.阿魏酰聚糖对大鼠抗氧化功能的影响及其作用机制试验选取40只健康雄性Wistar断奶大鼠(购于内蒙古大学动物实验中心),按体重相近原则完全随机分为5个组,分别为空白对照组(生理盐水)、低、中和高剂量麦麸FSs组(分别为20、40和80 mg/kg BW)以及维生素C对照组(100 mg/kg BW),每个处理8个重复,每重复1只。采用灌胃给予的方式,每日定时灌胃。饲养期21d。试验结束后分析大鼠血浆、肝脏和回肠组织组织抗氧化功能和相关抗氧化酶mRNA表达量,以及Nrf2-ARE信号通路的相关基因和蛋白表达水平。结果显示:与空白对照组相比,麦麸FSs可以显著提高正常大鼠血浆和回肠组织中总抗氧化能力(total antioxitant capacity,T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidas,GSH-Px)活性以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,肝脏组织中超氧化物岐酶(superoxide dismutase,SOD)活性,降低血浆、肝脏和回肠组织中8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)含量;显著提高大鼠肝脏和回肠中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2 p45-related factor 2,Nrf2)mRNA和蛋白表达量,上调下游谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(Glutamate cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)、血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-l,HO-1)和三种抗氧化酶mRNA表达水平。3.阿魏酰聚糖对氧化应激大鼠抗氧化功能的影响及其作用机制试验选取40只健康雄性wistar断奶大鼠(购于内蒙古大学动物实验中心),按体重相近原则完全随机分为5个组,分别为空白对照组(未攻毒+生理盐水)、负对照组(攻毒+生理盐水)、麦麸FSs组(攻毒+200 mg/kg BW和攻毒+400 mg/kg BW)和维生素C组(攻毒+100 mg/kg BW Vc),每个处理8个重复,每个重复1只。采用灌胃给予的方式,每日定时灌胃。饲养期15 d。试验结束当天,空白对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水,其它四组按0.1 mmol/kg BW腹腔注射敌草快建立氧化应激模型。攻毒12 h后分析大鼠血浆、肝脏和回肠组织组织抗氧化功能和相关抗氧化酶mRNA表达量,以及Nrf2-ARE信号通路的相关基因和蛋白表达水平。结果显示:麦麸FSs可以显著提高敌草快诱导氧化应激大鼠血浆、肝脏和回肠组织中GSH-Px活性和GSH含量,对SOD活性(血浆及回肠)、T-AOC和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性(肝脏及回肠)有明显得促进作用,并显著将低8-OHdG含量;显著提高氧化应激大鼠肝脏和回肠中Nrf2 mRNA和蛋白表达水平,提高肝脏中GCLC、HO-1和CAT、SOD以及GPX三种抗氧化酶mRNA表达量,同时进一步提高大鼠回肠中HO-1和CAT、SOD以及GPX三种抗氧化酶mRNA表达量。综上所述,发酵麸皮经Amberlite XAD-2和Sephadex LH-20分离纯化后可获得较纯的麦麸FSs,其浓度为0.099 mmol/g,能够显著清除DPPH和·OH自由基,有较强还原力;可以通过提高正常生理状态和敌草快诱导氧化应激大鼠Nrf2 mRNA和蛋白表达水平,上调下游GCLC、HO-1和抗氧化酶mRNA表达水平,提高抗氧化酶活性和GSH含量,降低DNA氧化损伤,提高机体抗氧化功能,发挥氧化防御作用。
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