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目的:探究黄芩素(baicalein,BAI)对黑色素瘤A375和B16细胞的抑癌作用及分子机制。方法:采用不同浓度BAI处理人黑色素瘤A375和鼠黑色素瘤B16细胞,MTT比色法检测细胞的增殖情况;克隆集落形成实验检测细胞的集落形成能力;细胞划痕实验观察细胞横向迁移情况;Transwell小室实验检测细胞的纵向迁移能力;Hoechst33342染色观察细胞凋亡小体的形成;细胞凋亡情况采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测;自噬体标记蛋白LC3的表达情况采用细胞免疫荧光染色法:蛋白印迹实验检测凋亡相关的蛋白、EMT相关的蛋白、LC3蛋白及信号通路相关的蛋白(Akt和Erk1/2信号通路)的表达水平。结果:1.MTT比色法实验表明:黑色素瘤A375和B16细胞经0、5、10、25、50μmol/L的BAI处理24h、48h、72h,与对照组相比,经BAI处理后的药物组黑色素瘤A375和BI6细胞的增殖受到明显的抑制,且呈现出浓度和时间的依赖性(P<0.05或P<0.01);2.克隆集落形成实验显示:黑色素瘤A375和B16细胞经浓度为0、5、10、25μmol/L的BAI处理两周后,与对照组相比较,BAI处理组的A375和B16细胞集落形成能力明显受到抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01);3.细胞划痕实验结果表明:黑色素瘤A375和B16细胞经浓度为0、5、10、25μmol/L的BAI处理24h、48h、72h后,相比于对照组,BAI处理组的A375和B16细胞横向迁移能力距离显著降低,且呈剂量依赖性(P<0.01);4.Transwell小室实验显示:黑色素瘤A375和B16细胞经浓度为0、5、10、25μmol/L的BAI处理48h后,与对照组相比较,其纵向迁移能力受到显著抑制(P<0.05或P<0.01);5.Hoechst33342染色实验结果显示:黑色素瘤A375和B16细胞经浓度为0、5、10、25lamol/L的BAI处理48h后,凋亡小体数量随BAI的浓度的增加而增加,呈浓度依赖性(P<0.01);6.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡结果显示:经25pmol/L的BAI处理后的黑色素瘤A375和B16细胞48h后,与对照组相比,两种细胞凋亡比率显著上调(P<0.01);7.细胞免疫荧光染色结果表明:25μmol/L的BAI处理黑色素瘤A375和B16细胞48h后,与对照组相比,LC3蛋白在两种细胞中的表达水平显著上调;8.蛋白印迹实验结果显示:0、5、10、25μmol/L的BAI处理A375和B16细胞48h后,与对照组相比,BAI处理组的两种细胞其凋亡相关蛋白Cleaved caspase 9、Cleaved caspase 3和Bax的表达上调,Bcl-2的表达下调(P<0.05或P<0.01);自噬体标记蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达水平上调(P<0.01);EMT标志物蛋白E-Cadherin的表达水平增多,Vimentin、Snail、MMP9以及MMP2的表达水平降低(P<0.05或P<0.01);Akt信号通路相关蛋白p-Akt和p-4EBP1以及Erk1/2信号通路相关蛋白p-Erkl/2的表达水平明显下降((P<0.05或P<0.01)),其相关总蛋白的表达量并无明显变化。结论:1.BAI具有抑制黑色素瘤A375和B16细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡、自噬和抑制EMT的发生等抑癌作用;2.BAI对黑色素瘤的抑癌作用与调控凋亡相关蛋白、LC3蛋白和下调Akt和Erk1/2信号通路蛋白水平相关。