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目的:血管内皮生长因子(VEGF),又称血管通透因子,它可以特异性地促进内皮细胞分裂、增殖,增加血管通透性,促进血管的形成;基质金属蛋白酶(MMPs)是一个高度锌离子依赖的蛋白水解酶家族,它能引起基底膜消化、细胞游走、新基底膜的形成,促进新血管的形成。二者在肿瘤的发生、发展及侵袭转移的过程中起着十分重要的作用。研究发现VEGF及MMPs基因中存在一些多态性位点可以通过调控基因的转录或蛋白的表达水平而影响肿瘤的发生、发展。本研究旨在探讨VEGF -2578C/A和VEGF +936C/T及MMP-12 -82A/G和MMP-13 -77A/G单核甘酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNPs)与我国北方妇女上皮性卵巢癌发病风险的关系,从分子生物学水平为卵巢癌的预防及诊治提供依据。方法:采用基于医院的病例-对照研究方法,以256例卵巢癌患者和329例健康对照妇女为研究对象。采用蛋白酶K-氯化钠盐析法提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法,对VEGF -2578C/A、VEGF +936C/T、MMP-12 -82A/G和MMP-13 -77A/G 4个SNPs进行基因分型。数据统计分析采用SPSS11.5版软件包(SPSS Company,Chicago,Illinois,USA)进行处理。正常对照组各基因型频率分布行χ2检验做Hardy-Weinberg平衡分析。病例组与对照组的年龄差异采用t检验,基因型和等位基因频率分布比较采用χ2检验,以非条件logistic回归方法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(confidence interval,CI)。采用EH软件分析VEGF -2578C/A和VEGF +936C/T以及MMP-12 -82A/G和MMP-13 -77A/G基因单体型频率,2LD软件分析连锁不平衡状态。P<0.05作为差异有显著性的标准。结果:1 VEGF -2578C/A和VEGF +936C/T多态与上皮性卵巢的关系1.1 VEGF -2578C/A多态的基因型和等位基因频率分布在上皮性卵巢癌组和对照组中无显著性差异(P=0.42和P=0.64)。与A/A+C/A基因型比较,C/C基因型与上皮性卵巢癌的发病风险无关,OR值为0.87(95%CI=0.63~1.21)。以病理类型、临床分期或确诊时年龄分层分析,VEGF -2578C/A的基因型和等位基因频率在各组间分布也均未发现显著性差异(P值均大于0.05)。1.2 VEGF +936C/T多态的基因型和等位基因频率分布在上皮性卵巢癌组和对照组中亦无显著性差异(P=0.67和P=0.79)。与T/T+C/T基因型比较,C/C基因型与上皮性卵巢癌的发病风险无关,OR值为0.93(95%CI=0.65~1.32)。以病理类型、临床分期或确诊时年龄分层分析,VEGF +936C/T的基因型和等位基因频率在各组间分布也均未发现显著性差异(P值均大于0.05)。1.3采用EH和2LD软件分析发现VEGF -2578C/A和+936C/T SNPs间不存在连锁不平衡关系(D’=0.15)。2 MMP-12 -82A/G和MMP-13 -77A/G多态与上皮性卵巢癌的关系2.1 MMP-12 -82 A/G SNP的A/A、A/G、G/G三种基因型频率在卵巢癌组和对照组中分别为93.0%、7.0%、0和96.7%、3.3%、0,两组相比有统计学差异(P =0.04);卵巢癌组G等位基因频率显著高于对照组,两组相比有统计学差异(P=0.04)。与A/A基因型相比,A/G基因型可显著增加上皮性卵巢癌的发病风险(OR=2.19,95%CI=1.01~4.72)。根据确诊年龄分层分析发现,与A/A基因型相比,A/G基因型可显著增加<50岁上皮性卵巢癌的发病风险(OR=3.00,95%CI=1.19~7.36);根据病理类型和临床分期分层分析发现,与A/A基因型相比,A/G基因型有增加低分化或晚期卵巢癌发病风险的趋势(OR=3.12,95%CI=0.97~10.61;OR=2.21,95%CI=0.95~5.12)。2.2 MMP-13 -77 A/G SNP的A/A、A/G、G/G三种基因型频率在卵巢癌组和对照组中分别为25.0%、51.6%、23.4%和20.7%、50.2%、29.2%,两组相比无统计学差异(P=0.21);A、G等位基因频率在卵巢癌组和对照组相比亦无统计学差异(P=0.09)。与G/G基因型相比,A/A基因型有增加上皮性卵巢癌的发病风险的趋势(OR=1.51,95%CI=0.94~2.41);而A/G基因型并不能改变上皮性卵巢癌的发病风险。根据病理类型分层分析发现,与G/G基因型相比,A/A基因型可显著增加粘液性卵巢癌的发病风险( OR=9.88 ,95%CI=2.18~44.91),并有增加浆液性卵巢癌发病风险的趋势(OR=1.86,95%CI=0.95~3.64);根据临床分期分层分析发现,与G/G基因型相比,A/G和A/A基因型均可显著增加早期上皮性卵巢癌的发病风险(OR=1.95,95%CI=1.02~3.73;OR=2.62,95%CI=1.28~5.39)。2.3采用2LD软件分析发现MMP-12 -82 A/G和MMP-13 -77 A/G SNPs间存在连锁不平衡关系(D′=0.51)。应用EH软件对MMP-12 -82 A/G及MMP-13 -77 A/G SNPs进行单体型分析,结果显示: MMP-12A/MMP-13G ( 53.3% )、MMP-12A/MMP-13A(45.0%)、MMP-12G/MMP-13G(0.9%)和MMP-12G/MMP-13A(0.8%)四种单体型分布在上皮性卵巢癌组与对照组间无统计学差异(P>0.05)。结论:1 VEGF -2578C/A和VEGF +936C/T的基因多态性可能与中国北方妇女上皮性卵巢癌遗传易感性无关。2与A/A基因型相比,携带MMP-12 -82A/G基因型可以显著增加中国北方妇女上皮性卵巢癌的发病风险,并与卵巢癌的病理类型及年龄有显著关联性,其可能是上皮性卵巢癌发病的潜在危险因素。3与G/G基因型相比,携带MMP-13 -77A/A基因型有增加中国北方妇女上皮性卵巢癌的发病风险的趋势,并与卵巢癌的病理类型及临床分期有显著关联,其可能增加上皮性卵巢癌的发病风险。4中国北方妇女中MMP-12 -82A/G和MMP-13 -77A/G多态间存在连锁不平衡。MMP-12A/MMP-13G为最常见单体型,与MMP-12A/MMP-13G相比,MMP-12 A/MMP-13 -77A单体型有增加EOC发病风险的趋势。