建立良好的稻瘟病菌的有性杂交体系和优化培养条件是进行无毒性遗传分析的前提.该研究首先选用自然成熟的番茄榨汁和燕麦片作为培养基的主要组分,通过调节培养基pH值在5.5左右并添加0.1﹪CaCO<,3>途径优化了稻瘟病菌有性世代形成的条件,显著增加了稻瘟病菌子囊壳形成的数量和子囊孢子的成活率.观察发现,虽然不同杂交组合间有一定差异,分离稻瘟病菌子囊孢子的适宜时期,一般在子囊壳开始出现后7~18天之间;在此期间分离出的子囊孢子成活率最高可达85.5﹪.此外,还建立了一种分离单子囊孢子的简便易行方法.该研究组建了稻瘟病菌的9个有性杂交组合,从中共分离出500多个子囊孢子菌株,分别测定了它们在相应水稻品种梅雨明、石狩白毛和爱知旭上的无毒性分离情况.为了获得与稻瘟病菌无毒基因AVR-Pii和AVR-Pia连锁的分子标记,从近500个随机引物中筛选出2个引物OPI07和OPM10,可以扩增出与无毒基因AVR-Pii连锁的标记,分别定名为OPI07<,700>和OPM10<,1314>.该研究还克隆了一个与无毒基因AVR-Pik紧密连锁的RAPD标记OPE12<,1406>,核苷酸序列为1406bp.