沙眼衣原体（Ct）是引起沙眼、非淋球菌尿道炎和许多泌尿生殖道疾病的病原微生物。其18个血清型都具有一个主要外膜蛋白（Major Outer MembraneProtein,MOMP）,不仅在介导Ct黏附宿主细胞的过程中起重要作用,而且本身作为一种重要的免疫原能刺激机体产生细胞免疫和体液免疫,而ompA基因是编码Ct MOMP的结构基因。因此,根据ompA基因的特异性,制备具有良好免疫原性的MOMP抗原,对研究Ct的致病机制、临床快速诊断Ct感染的试剂盒研发、肽芯片及疫苗制备等有重要意义。本文分析了Ct 18个血清型ompA基因的碱基序列,B型ompA基因与其它型别相比,其表达产物有2-3个氨基酸的差异,因此确定选用B/TW-5 ompA表位,共62个氨基酸。并根据大肠杆菌的偏好密码子优化、设计并合成碱基序列,使得拟表达的目的基因序列能够较好地与原核表达系统相匹配,提高表达效率。通过目的基因片段与pET-41a构建重组质粒并转化大肠杆菌后,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,得到了分子量约为34KD的重组蛋白,并将选定的表达株放大培养,采用柱层析方法纯化重组蛋白,确定了结合缓冲液:Na₂H PO₄:NaH₂PO₄ 3:2（20mmol/L）,8M/L尿素,5mmol/L咪唑,pH8.0;洗脱缓冲液:Na₂H PO₄:NaH₂PO₄ 3:2（20mmol/L）,8M/L尿素,500mmol/L咪唑,pH8.0,分别用5%,10%,15%,20%,25%,洗脱液梯度洗涤样品,是比较合适的纯化目的蛋白的条件。纯化后蛋白用ELISA检测临床血清标本,敏感性为85.7%,特异性为87.8%。