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CRISPR/Cas系统作为准确且高效的基因编辑技术近年来备受追捧,应用前景非常广阔。利用基因编辑技术定点修正遗传致病基因是基因治疗的重要研究方向。在本研究中,我们选用了 Ⅰ型遗传型酪氨酸血症(HTI)这一大鼠遗传疾病模型,Ⅰ型遗传型酪氨酸血症是由于酪氨酸分解代谢途径的最后一种酶—延胡索酰乙酰乙酸水解酶(Fumarylacetoacetate hydrolase,简称FAH)基因突变导致的常染色体隐形遗传代谢疾病。与传统FAH缺陷的动物模型例如猪和小鼠相比,FAH基因缺陷的大鼠具有肝纤维化和肝硬化的典型临床病症,与人Ⅰ型遗传型酪氨酸血症患者表征非常相似。本论文首先利用CRISPR/Cas基因编辑技术构建Fah-/-大鼠模型,通过鉴定,构建的模型很好地呈现了肝功能损伤的表型。随后,利用腺病毒递送体系,通过尾静脉注射逆转肝损伤从而在成体大鼠模型中修复肝细胞的功能。实验组大鼠进行尾静脉注射病毒后撤去NTBC能长期存活超过三个多月,虽然肝细胞的初始修复效率不高,但足够修复Fah-/-大鼠肝功能损伤使其免于死亡。对实验组大鼠进行持续检测,大鼠体重逐渐恢复,肝损伤指标ALT、AST、TBIL降低,ALB升高。此外,修复大鼠肝脏切片的免疫组化染色显示Fah 阳性细胞达到90%,修复的肝细胞很大程度上缓解了肝纤维化和肝硬化。综上所述,本课题的实验结果证明了腺病毒介导的基因治疗成功地修复了遗传型酪氨酸血症大鼠模型的肝功能,由此说明Cas9介导的成体基因编辑是遗传疾病的潜在治疗方式。