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本实验采用免疫组织化学(SP)法,探讨MMP-9及TIMP-1在胆管癌中的表达及其与胆管癌生物学行为的关系。
研究方法:本实验采用1988年8月至2004年8月在河北医科大学第二医院切除的肝外胆管癌石蜡包埋组织42例,另取胆总管结石胆肠吻合术时切取的胆管组织10例作正常对照。所有肝外胆管癌患者术前均未经过任何放、化疗,所有标本经病理科两位专家确定其病理,按组织学分级将肝外胆管癌分为高分化和低分化腺癌;按有无淋巴结转移分为转移组和非转移组;临床分期采用UICC(国际抗癌协会)的TNM标准。42例肝外胆管癌中男性28例,女性14例,年龄跨度为32~78岁,平均59.5岁;高分化胆管癌18例,低分化胆管癌24例;无淋巴结转移的胆管癌为19例,有淋巴结转移为23例;TNM分期Ⅰ期为3例,Ⅱ期为16例,Ⅲ期为13例,Ⅳ期为10例;肝门部胆管癌14例,中段胆管癌11例,下段胆管癌17例。组织标本(胆管癌和正常组织)经100ml/L甲醛固定,浸蜡包埋,4um连续切片4张,1张行HE染色复查诊断,其余3张行免疫组化SP(链霉素抗生物素蛋白-过氧化物)染色法染色,检测MMP-9及TIMP-1的表达情况。MMP-9,TIMP-1以细胞膜或细胞浆内出现棕黄色颗粒者为阳性,不出现者为阴性。参照文献作半定量分级:根据细胞着色深浅记分:0分为无色,1分为淡黄色,2分为黄色,3分为棕黄色;按阳性细胞所占百分比分为四级记分:0分为阴,1分为阳性细胞11~50%,3分为阳性细胞51~75%,4分为阳性细胞>75%。两者乘积>3分记为(+),6~9分为(++),12分为(+++),凡(+)或以上者均为阳性表达。采用X2检验及四格表精确概率法对结果进行统计学处理。
研究结果:1MMP-9及TIMP-1的阳性表达在胆管癌组和正常胆管上皮组差别有显著意义(P<0.01)。2MMP-9在胆管癌组织中阳性表达随分化程度降低而增高,TIMP-1阳性表达则随分化程度降低而降低,两者均有统计学意义(P<0.05)。3MMP-9在有淋巴结转移组的阳性表达强于无淋巴结转移组(P<0.05),TIMP-1的阳性表达则相反。4MMP-9在胆管癌组织中的阳性表达同TNM临床分期呈正相关(P<0.05),而TIMP-1的阳性表达同临床分期呈负相关。5MMP-9及TIMP-1在胆管癌中的表达同年龄、性别及肿瘤位置等无关(P>0.05)。
研究结论:本研究表明,MMP-9、TIMP-1的阳性表达与胆管痛的组织分化程度、淋巴结转移和临床分期等密切相关;MMP-9及TIMP-1在胆管癌中的表达同年龄、性别和肿瘤位置等无关;MMP-9的高表达可能与胆管癌转移行为有关,TIMP-1可能抑制胆管癌的浸润转移。MMP-9和TIMP-1可能是反映胆管癌生物学形为、侵袭和转移潜能以及评估预后的重要生物学标计物。