氨基酸营养缺乏对泌乳小鼠乳腺与肌肉组织蛋白质代谢相关基因表达影响的研究

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动物体氨基酸营养缺乏时,乳腺组织表现出与肌肉等其他外周体组织不同的反应。乳腺组织对血液氨基酸的提取率升高,以获得更多的氨基酸来满足乳蛋白合成的需要;肌肉等组织则分解蛋白质,将沉积的氨基酸释放出来进入血液循环,因此在体内氨基酸营养分配上,泌乳是优先于维持的代谢过程。对其中的机制还不清楚。本试验以小白鼠为动物模型,用不同蛋白水平和能量水平的日粮组对生产后泌乳母鼠进行处理,采集血液、乳腺组织和肌肉组织,用放射性免疫法测定血液中激素含量,用全自动生化分析仪测定血液中血糖含量,用实时荧光定量法对乳腺及肌肉组织中特征蛋白及泛素-蛋白水解酶复合体通路相关基因表达量进行分析,用蛋白免疫印迹法测定乳腺及肌肉组织中蛋白代谢mTOR途径相关因子及氨基酸载体的蛋白表达量。本研究结果:(1)日粮中蛋白或能量胁迫对β-casein、MHC2α的表达产生显著影响(P<0.01,P<0.05)。处理组乳腺组织β-casein mRNA表达量均升高,尤以仅提供能量组升高最显著,其次是饥饿组(P<0.01),其他处理组表达量也升高但无统计学差异。试验处理对肌肉组织中肌动蛋白α-actin的mRNA表达虽无显著影响,但使其有明显下降趋势,饥饿组下降幅度最大。同时,处理组中MHC2αmRNA的表达量显著降低(P<0.05),但各处理组间无显著差异。(2)不同日粮处理对泛素系统中PolyUbc、E214k及C2的mRNA表达量均有显著影响(P<0.01),有显著差异的处理组中其表达量水平均为上调。与饥饿组相比,E214k和C2mRNA在提供能量组表达水平最高。(3)处理组中血液IGF-1含量均显著降低(P<0.01),但各处理组间差异不显著;饥饿组PRL含量下降,其他处理组PRL含量均上升,但各处理组间差异不显著。(4)处理组对酪蛋白合成通路中p70S6K的磷酸化水平影响显著(P<0.05),各处理组均使其磷酸化水平升高,饥饿组和仅供能量组的升高幅度更大。处理组乳腺组织中Lys及Arg载体CAT1表达量均升高(P<0.05),与提供蛋白组相比,饥饿组和仅供能量组的升高幅度略小。Met载体ASCT2表达量有下降趋势。此外,虽未见显著性差异,但处理组使mTOR及4EBP1磷酸化水平均升高。(5)除提供不足量蛋白组外,处理组肌肉组织中mTOR通路下游信号因子p70S6K磷酸化水平均升高,但升高幅度远低于乳腺组织。此外,mTOR及4EBP1磷酸化水平也有升高趋势,但幅度也均低于乳腺组织。Met载体ASCT2表达量均下降(P<0.05),饥饿组下降幅度最大。
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