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随着现代社会的发展,乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)作为危害人类健康的一个重大问题,引起了人们的广泛关注。HBV的精准检测有助于肝炎疾病的治疗和预防。生物传感器由于特异性强、灵敏度高等优点,在疾病检测等方面被广泛使用。本论文选用乙肝表面抗原(Hepatitis B surface antigen,HBsAg)作为目标检测物,设计了两种电化学免疫传感器。主要进行的研究内容如下:(1)基于壳聚糖-二茂铁-氨基化多壁碳纳米管/金(Chitosan-Ferrocene-Aminated multi-walled carbon nanotube/Gold nanoparticles,CS-Fc-AMWNTs/Au NPs)纳米复合材料制备的电流型免疫传感器。首先,通过席夫碱反应合成CS-Fc-AMWNTs复合纳米材料,利用其大的比表面积和良好的导电性,作为乙肝表面抗体(Hepatitis B surface antibody,HBsAb)固定和加速电子转移的有效传感平台。其中Fc作为氧化还原探针,可提供用于免疫检测的电化学信号。通过特异性免疫反应捕获HBsAg,形成抗体抗原免疫复合物,使得电极表面阻抗增大,阻碍Fc的电子传输,导致电流信号下降。响应电流与HBsAg的浓度呈线性相关性,最后通过测定所产生响应电流的大小来实现对HBsAg的定量检测。在优化条件下,该免疫传感器的线性检测范围为1-250 ng/mL,检出限为0.26 ng/mL(S/N=3)。结果表明,用此方法制备的免疫传感器性能良好,稳定性高,对HBsAg的检测具有一定的临床应用价值。(2)基于纳米花-纳米金/氨基化多壁碳纳米管-硫堇(Nanoflower-Gold nanoparticles/Aminated multi-walled carbon nanotubes-Thionine,NF-Au NPs/AMWNTsTHI)复合材料构建的电化学免疫传感器。将AMWNTs-THI复合材料修饰在电极表面,利用Au-S键的作用将NF-Au NPs附着在电极上。NF-Au NPs/AMWNTs-THI通过其良好的电导性,构成吸附抗体与增强电子转移速率的传感界面,Cu离子作为电化学活性探针,其它复合材料协同作用增强电信号。HBsAg被固定在电极上的包被抗体所捕获,反应电流会随着免疫复合物的增加而减小,通过构建响应电流与不同浓度HBsAg之间的关系,达到定量检测的效果。实验结果表明,HBsAg的检测范围为0.5-400 ng/mL,检测限为0.12 ng/mL。该免疫传感器灵敏度高、可靠性强,可以实现对HBsAg的检测要求。