牦牛皱胃全长转录组测序与胃溶菌酶突变表达及抑菌研究

来源 :西南民族大学 |
牦牛(Bos grunniens)是高寒地区特有牛种,长期以来为高原地区的牧民提供了食、住、行等有效生活保障和经济来源。牦牛皱胃作为新生牦牛唯一具有消化功能的真胃,不仅能分泌胃酸以消化食物中的蛋白质和脂肪,还能分泌具有抗
牦牛(Bos grunniens)是高寒地区特有牛种,长期以来为高原地区的牧民提供了食、住、行等有效生活保障和经济来源。牦牛皱胃作为新生牦牛唯一具有消化功能的真胃,不仅能分泌胃酸以消化食物中的蛋白质和脂肪,还能分泌具有抗酸、抗胃蛋白酶能力的溶菌酶。溶菌酶(lysozyme,LYZ)是动物机体中关键的先天免疫因子,具有杀菌、抗病毒、抗炎和免疫调节作用。本研究利用PacBio SMRT测序技术对牦牛皱胃全长转录组进行测序,获得了牦牛皱胃全长转录组数据。并对牦牛胃溶菌酶(yak stomach lysozyme 1a,ysLYZ1a)和氨基酸突变牦牛胃溶菌酶(mutant yak stomach lysozyme 1a,mysLYZ1a)进行真核表达与纯化。利用体外试验探究ysLYZ1a、mysLYZ1a对金黄色葡萄球菌、E.coli O111和肠沙门氏菌的抑制作用,利用体内试验探究ysLYZ1a、mysLYZ1a对小鼠E.coli O111腹泻的治疗效果。主要研究结果如下:1.利用PacBio Sequel平台测序获得了牦牛皱胃全长转录组数据,共获得14 467 420个子序列,过滤和去冗余后对比参考基因组最终获得8 556条非重复序列(Unigenes)。对转录组数据进行了NR、Swiss-Prot、KEGG、KOG、egg NOG、GO和Pfam七大数据库对比注释,分别注释到8 544、8 475、1 721、6 572、8 491、7 725、8 162条Unigenes。通过转录因子(transcription factor,TF)注释分析得到943个TFs,分布在51个TFs家族。CDS预测到8 544个基因片段可视为CDS编码区,共有82条注释到溶菌酶序列。SSR分析检索出3 596个SSR位点,可变剪切分析得到1 825个可变剪接事件。2.通过查阅文献资料,确定mysLYZ1a氨基酸突变位点:A18D、K43T、Q102S。利用人工合成的方法构建ysLYZ1a和mysLYZ1a基因的真核表达载体p PICZαA-ysLYZ1a、p PICZαA-mysLYZ1a,化学法转化至毕赤酵母X33菌株。诱导表达并纯化后ysLYZ1a比酶活为1 424.17 U/mg,mysLYZ1a比酶活为2 649.28U/mg。结果表明mysLYZ1a比酶活比ysLYZ1a比酶活提高了1 225.11 U/mg。3.通过体外抑菌试验,表明ysLYZ1a和mysLYZ1a对3种试验菌的抑菌效果由强到弱是:金黄色葡萄球菌>肠沙门氏菌>E.coli O111。在体内模型试验中,通过腹腔注射E.coli O111建立小鼠腹泻模型,使用抗生素、ysLYZ1a和mysLYZ1a分别对腹泻小鼠进行治疗,并与正常组、感染组比较。与正常组相比,感染组小鼠体重明显下降,白细胞数目显著增多,肺脏、脾脏指数显著增高(P<0.05),十二指肠损伤严重,而经抗生素、ysLYZ1a、mysLYZ1a治疗后各组指标较感染组均有所改善。通过对各组小鼠肠道菌群α多样性和β多样性分析,结果显示,E.coli O111感染会显著降低肠道菌群多样性和丰富度(P<0.05)。感染组肠道菌群变形菌门、厚壁菌门相对丰度显著增加,而拟杆菌门显著减少;mysLYZ1a、抗生素治疗后拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门的比例基本恢复正常,弯曲杆菌少量增多;而ysLYZ1a治疗后变形菌门仍有所增多。mysLYZ1a、抗生素可通过增加肠道有益菌丰度和降低有害菌丰度来恢复菌群结构,ysLYZ1a组还存在少量大肠杆菌,有害菌增加,少量有益菌增加,ysLYZ1a组治疗效果较mysLYZ1a组和抗生素组差。
<正>随着物质生活水平的提高,人民群众对健康的需求越来越多,安全用药日渐成为公众关注的热点和焦点。所谓合理用药是以当代药物和疾病的系统知识为基础,有效、安全、经济、
<正>据中国互联网络信息中心发布的《第22次中国互联网络发展状况统计报告》显示,截至2008年6月底,中国网民数量达到了2.53亿,跃居世界第一位。如此庞大的用户群和信息流量,
文章介绍在首营企业、首营品种进行资质审核时应注意的关键环节,从源头严把审核关,建立首营企业、首营品种资质审核:包括药品、医疗器械、食品、化妆品等所有产品就企业许可
因为我是办学报的,就谈一点对《云梦学刊》及其特色栏目的认识.一、关于《云梦学刊》"当代学术史研究"栏目的评价大家都可以看出,虽然是一个地方高校主办的学术刊物,《云梦学
期刊
从手工缝扎方法和染料固色方法两方面探讨活性染料对真丝织物的扎染新工艺。首先进行单色扎染,将微波加热用于活性染料的固色,并通过试验发现染料利用率随着微波加热时间的延
一、让亲情不再干瘪  高三模拟考试作文题目从“对视”到“告诉你”,从“免费”到“习惯之后”,每一次我们都会说同一个问题:写作素材匮乏。为什么我们的学生只能和母亲对视?为什么总是母亲告诉你?为什么很多学生写有一个“免费的母亲”?为什么很多学生写习惯了母爱?为什么他们总是写不出又跳不出亲情这个圈子?  写不出是因为只是将亲情当作僵硬固化的浮雕,而不是一片包容万物的汪洋。打开记忆的闸门,我们可以这样跟学
目前普通本科院校的心理学实验教学面临诸多困境:心理学实验课程体系有待完善;教学内容陈旧,实验教学方式、教学评价方式单一;实验室硬件薄弱;教师队伍参差不齐,观念落后。对
Gemini表面活性剂是具有两条疏水链、两个亲水基和一个连接基团的新型表面活性剂。与传统表面活性剂相比,Gemini表面活性剂的表面活性要高出数个数量级。含有酰胺基团的表面活性剂具有良好的生物降解性和低刺激性,因此广泛应用于洗涤剂、化妆品及矿物浮选药剂中。本文合成了一类含有酰胺基团的Gemini阳离子表面活性剂和一类没有酰胺基团的Gemini阳离子表面活性剂,研究了这两类表面活性剂在不同体系中的性
“人的活力来源于运动,企业的活力则分别来源于变革能力、人和企业文化。”  这是远洋地产总裁李明对企业发展的独特观点。作为一位体育健将,他是足球场上的前锋,也是篮球场上天生的后卫。他认为,人在35岁之前,运动、体能是活力的重要源泉和保障。作为一个企业领导者,他是房地产这一“竞技场”上的前锋,他用个人的活力带出了企业发展的活力。在房地产市场上,他带领远洋地产前冲后突,闯出了一片属于远洋地产的天空。
期刊
文献的收录与引用情况在一定程度上彰显了该文献的学术影响力,也是对其作者进行评价的重要依据之一,因此,快速精准地检索出批量文献的收录与引用情况对后续学术评价工作的快
目的:连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy CRRT)是危重症患者治疗领域的重大进步,它能够清除炎症介质、维持内环境稳定、替代肾脏功能。但安全有效的
介绍了图像火检系统的工作原理、特点及应用情况。图像火检系统可以准确地实现单火嘴火焰检测 ,同时使运行人员在集控室看到每一个燃烧器的真实火焰图像 ,为大型锅炉防爆、确
银杏是最古老的孑遗植物,银杏花粉是银杏重要的雄性细胞,是最精深的物质所在。从银杏花粉的形态及系统学地位、花粉的萌发生长、花粉产量、贮藏和生活力、花粉中的活性成分和
针对大面积、高产量和节约型印制电路板(PCB)生产使用的激光投影光刻机,利用ZEMAX工程光学设计软件,对其投影系统进行了模拟设计与优化,并对优化后的结果进行了分析。对于设计
【摘 要】中华民族传统文化博大精深,其中许多传统内容极具德育功能,历史课堂作为讲授传统文化的重要载体,也就起到发挥传统文化德育功能的重要作用。  【关键词】传统文化;德育功能;传统道德教育  历史教育对继承优秀传统文化,提高国民素质,推动社会发展具有重要意义。中学生是祖国未来的建设者和中国特色社会主义事业的接班人,他们的思想道德状况事关国家和民族的未来。历史教学在传统道德文化教育方面有着得天独厚的
充分考虑高职高专教学现状,将微课引入实验教学中,探讨微课在高职高专药物制剂工艺与制备实验教学中的应用。
本文通过对荣华二采区10
摘 要:文章用“电能转化为化学能——电解”章节为例,讨论如何在化学概念原理的备课过程中将复杂的概念原理层层剥析,让学生更容易理解,并且树立学生在化学这门课中独立思考的意识。  关键词:概念原理;本质;深层理解;化学思维;电解  学习化学,不仅仅是为了完成考试要求,更是为了让学生从事物运行过程中找到物质转化的实质,在脑海中建立并理解原理。所以,这要求老师在上课前要深入理解概念原理,发现他们的实质,并
摘要:阅读教学在小学语文教育中有着举足轻重的作用。对此,本文对小学阅读教学中最新的值得推荐的经验和在日常教学中运用这些经验时出现的问题加以论述,以期给实践工作者以启发。  关键词:阅读教学 发散性思维 多媒体应用  阅读教学是小学语文教学中的重要组成部分。阅读教学的好坏直接影响到语文教学质量的优和劣。这就要求我们必须加强对阅读教学的研究,切实提高阅读教学的质量。  现列举一些在阅读教学中好的经
六年级了还不会扎辫子,妈妈为此经常数落我,每次我都只是害羞不语,却也懒于尝试。  这天清晨,妈妈急匆匆地把我从床上拖起来:“快点,我马上要出发去比赛了,奶奶不在家,我还得帮你梳头!”我迷迷糊糊地穿好衣服,懒洋洋地往马桶上一靠。忽然,妈妈手机铃声响起。我意识到情况不妙,慌忙从马桶上站起,可为时已晚,急先锋妈妈已冲到门口,扔下一句:“我先走了!”便摔门而去。  额,妈妈走了,那我的辫子怎么办?看着镜子
期刊
近日,人社部印发《技工教育“十三五”规划》(以下简称《规划》),这是人力资源社会保障部第一个关于技工教育的五年规划。《规划》定位于发挥指导性、规范性、引领性作用,为全国技工教育事业描绘发展蓝图,推动全国技工院校科学发展。  《规划》系统阐述了“十三五”时期技工教育事业发展的4条基本原则、6大发展目标、10项主要发展指标、若干重点举措,明确提出到“十三五”末期,基本形成办学规模适合市场需求、专业结构
期刊