【摘 要】
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目的:探讨自然界中常见的类黄酮糖苷化合物芹菜素-7-葡萄糖苷(A7DG)对草酸诱导的人近端肾小管上皮细胞HK-2损伤是否具有修复作用及其具体作用途径。方法:培养HK-2细胞到80%生长密度后分成3组并进行不同处理:(1)NC组:换用基础培养液继续培养;(2)OX组:换用含浓度为2 mmol/L草酸的基础培养液进行培养;(3)A7DG药物干预组:换用含2 mmol/L草酸和不同浓度的A7DG的基础培
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(No:82070723);
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目的:探讨自然界中常见的类黄酮糖苷化合物芹菜素-7-葡萄糖苷(A7DG)对草酸诱导的人近端肾小管上皮细胞HK-2损伤是否具有修复作用及其具体作用途径。方法:培养HK-2细胞到80%生长密度后分成3组并进行不同处理:(1)NC组:换用基础培养液继续培养;(2)OX组:换用含浓度为2 mmol/L草酸的基础培养液进行培养;(3)A7DG药物干预组:换用含2 mmol/L草酸和不同浓度的A7DG的基础培养液进行培养。经不同条件处理24 h后,分别对3组HK-2细胞进行细胞活力检测(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)及抗氧化能力相关指标还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测,使用荧光显微镜检测线粒体膜电位(MMP)的变化,使用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞内NOX4、NOX2、p22、GRP78/BIP、IRE1、p-IRE1、p-ASK1、p38、p-p38、CHOP以及炎症相关因子IL-2、IL-6的蛋白表达情况。结果:CCK-8实验结果表明OX组细胞存活率较NC组明显降低,而A7DG减轻了OX对HK-2细胞的损伤。LDH、GSH、SOD及MDA检测结果表明A7DG可降低草酸预处理后HK-2细胞NADPH氧化酶的释放,通过干预草酸介导的活性氧(ROS)减轻草酸对HK-2细胞产生的损伤,并使异常的MMP恢复至正常。此外,蛋白质印迹显示A7DG干预下氧化应激特征蛋白如GRP78,CHOP以及IRE1途径关键蛋白p-IRE1、p-ASK、p-MAPK的蛋白表达显著降低,氧化应激损伤途径中IL-2、IL-6等炎性因子的表达也降低。结论:本研究结果证实A7DG在草酸诱导的HK-2细胞损伤中具有积极修复作用,且通过IRE1/ASK1/P38MAPK信号通路发挥积极地抗氧化作用,A7DG可为草酸介导的肾损伤和尿路结石的治疗提供新的参考。
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