目的 探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)基因表达水平下降对具有滋养细胞特点的绒毛膜癌(绒癌)细胞株JEG-3细胞增殖和侵袭能力的影响,了解HLA-G基因在子痫前期发生、发展中的作用.方法 采用高表达HLA-G的JEG-3细胞进行体外培养,将培养好的细胞分为实验组(转染HLA.G小分子干扰RNA)、阴性对照组(转染阴性对照小分子干扰RNA)和空白对照组(不进行细胞转染,仅转染脂质体)3组进行细胞转染.应用RT-PCR技术和蛋白印迹法检测转染后各组JEG-3细胞中HLA-G mRNA和蛋白的表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞技术、穿膜小室侵袭实验分别检测转染后各组JEG-3细胞增殖能力、细胞周期、凋亡抑制率和侵袭能力的变化.结果 (1)转染后JEG-3细胞中HLA-G mRNA和蛋白的表达水平,实验组分别为0.0013±0.0014、0.0163±0.O007.分别与空白对照组(分别为0.1923 ±0.0384、0.2184 ±0.0153)比较,差异均有统计学意义(P<O.05);阴性对照组分别为(0.1606 ±0.0133、0.2020 ±0.0132),分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)转染48 h后JEG-3细胞的增殖能力,实验组的积分吸光度(伪)值为0.44±0.04,与空白对照组(O.75 ±0.13)比较,差异有统计学意义(P<0.01);阴性对照组为0.69 ±0.10,与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)转染72 h后的细胞周期比例,实验组G2/M期细胞比例为(10.9 ±2.2)%,低于空白对照组[(15.4 ±1.9)%];S期细胞比例为(58.6±0.8)%,高于空白对照组[(52.9 ±2.3)%].两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(4)转染72 h后的细胞凋亡率,实验组为(14.5±2.7)%,高于阴性对照组[(5.3 ±1.1)%]和空白对照组[(4.7 ±0.6)%],差异均有统计学意义(P<0.01).(5)转染72 h后穿膜小室中的穿膜细胞数,实验组为(121±12)个,低于空白对照组[(452 ±17)个],差异有统计学意义(P<0.01).结论 HLA-G基因表达水平的下降可以影响滋养细胞的增殖、凋亡、侵袭和细胞周期.HLA-G基因可能通过调节滋养细胞增殖、侵袭等过程参与子痫前期的发生。
人类白细胞抗原G基因表达水平下降对滋养细胞增殖和侵袭能力的影响
【摘 要】
:
目的 探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)基因表达水平下降对具有滋养细胞特点的绒毛膜癌(绒癌)细胞株JEG-3细胞增殖和侵袭能力的影响,了解HLA-G基因在子痫前期发生、发展中的作用.方法 采用高表达HLA-G的JEG-3细胞进行体外培养,将培养好的细胞分为实验组(转染HLA.G小分子干扰RNA)、阴性对照组(转染阴性对照小分子干扰RNA)和空白对照组(不进行细胞转染,仅转染脂质体)3组进行细胞转染
【机 构】
:
200011,上海,复旦大学附属妇产科医院产科,200011,上海,复旦大学附属妇产科医院产科,200011,上海,复旦大学附属妇产科医院产科
【发表日期】
:
2008年43期
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