球孢白僵菌丝氨酸蛋白酶基因CDEP-1在毕赤酵母中的表达

来源 :菌物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guoaiet

【摘要】

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我们从球孢白僵菌中克隆了丝氨酸蛋白酶Pr1类基因CDEP-1。为明确CDEP-1的功能、评价其在害虫生物防治中的潜力，需要大量制备具有生物活性的CDEP-1编码蛋白。由于大肠杆菌系统

【作者】

：

范艳华张永军罗志兵冯静方卫国裴炎

【机构】

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农业部生物技术与作物品质改良重点实验室、重庆市农业生物技术重点实验室、西南大学生物技术中心

【出处】

：

菌物学报

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

：

毒力因子凝胶过滤层析抗血清 Virulence factor gel filtration chromatography antiserum

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我们从球孢白僵菌中克隆了丝氨酸蛋白酶Pr1类基因CDEP-1。为明确CDEP-1的功能、评价其在害虫生物防治中的潜力，需要大量制备具有生物活性的CDEP-1编码蛋白。由于大肠杆菌系统表达真核基因存在产物复性困难的问题，本文利用毕赤酵母系统来表达CDEP-1。结果表明，CDEP-1可在毕赤酵母中高效的分泌表达，而且产物活性高，甲醇诱导48h后上清液中的酶活即可达到38，266U／L。诱导表达的上清液经浓缩后进行凝胶过滤层析，得到了CDEP-1的初纯品，蛋白质含量为50mg／L。将纯化的蛋白酶CDEP-1免疫

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