【摘 要】
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目的：探讨肝内胆管癌相关成纤维细胞（iCAFs）的分离、纯化和鉴定方法,为后续研究奠定基础。方法：在无菌条件下,留取肝内胆管细胞癌（iCCA）组织标本,充分剪碎后置入含Ⅳ型胶原酶和透明
【机 构】
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复旦大学附属中山医院重症医学科,复旦大学附属中山医院肝外科
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目的：探讨肝内胆管癌相关成纤维细胞（iCAFs）的分离、纯化和鉴定方法,为后续研究奠定基础。方法：在无菌条件下,留取肝内胆管细胞癌（iCCA）组织标本,充分剪碎后置入含Ⅳ型胶原酶和透明质酸酶的消化液中恒温振荡,将所得的单细胞悬液进行免疫磁珠分选纯化,分离出肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）并培养。通过观察细胞形态,并经免疫荧光和流式细胞仪测定,鉴定其是否为iCAFs。结果：iCAFs呈长条形或纺锤形,胞质透明,折光明显,胞核单个、呈圆形或卵圆形,细胞突起相互交错重叠形成网格状排列、密集时呈现＂峰-谷＂样表现;
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