【摘 要】
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目的:探索肾细胞来源的外泌体对软骨细胞的保护作用。方法:利用差速离心法提取大鼠肾小管上皮细胞分泌的外泌体,电镜法及Western blot法鉴定所提取的外泌体;免疫荧光法检测软骨细胞对外泌体的摄取情况;RT-qPCR检测软骨细胞解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)、基质金属蛋白酶(MMP-13)mRNA的表达情况;流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况。将外泌体分为高浓度和低浓度分别干预软骨细胞,用C
【机 构】
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南京中医药大学附属医院江苏省中医院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81804123); 江苏省中医药领军人才项目(No.SLJ0207)~~;
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目的:探索肾细胞来源的外泌体对软骨细胞的保护作用。方法:利用差速离心法提取大鼠肾小管上皮细胞分泌的外泌体,电镜法及Western blot法鉴定所提取的外泌体;免疫荧光法检测软骨细胞对外泌体的摄取情况;RT-qPCR检测软骨细胞解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)、基质金属蛋白酶(MMP-13)mRNA的表达情况;流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况。将外泌体分为高浓度和低浓度分别干预软骨细胞,用CCK-8法检测软骨细胞增殖情况;ELISA检测细胞上清中ADAMTS5、MMP-13蛋白表达情况。结果:白介素组ADAMTS5、MMP-13 mRNA表达显著高于空白组,低于外泌体组(P<0.01);白介素组细胞上清中ADAMTS5、MMP-13蛋白表达量显著高于空白组,低于外泌体组(P<0.01);联合干预组软骨细胞凋亡率显著低于IL-1β组(P<0.01);高、低浓度外泌体组软骨细胞增殖高于对照组(P<0.01)。结论:大鼠肾细胞分泌的外泌体可以促进软骨细胞增殖,一定程度上抑制软骨炎症反应减少软骨细胞凋亡,发挥一定的保护软骨细胞的作用,但外泌体对软骨细胞增殖的作用与浓度无关。
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