大鼠α—酰胺酶在变铅青链霉菌中的克隆及表达研究

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qhjxiaofeitian

【摘要】

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α－酰胺酶（α－ａｍｉｄａｓｅ，α－ＡＥ）催化神经和内分泌系统中活性多肽的Ｃ－端酰胺化，多多肽的生物活性至关重要。以大鼠心房组织的总ＲＮＡ为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增获得编码α－酰胺酶的ｃＤＮＡ，并进行了克隆和测序。为了使α

【作者】

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武兵元李元

【机构】

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中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

2000年5期

【关键词】

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酰胺酶基因克隆变铅青链霉菌酰胺化多肽 amidase gene cloning and expression Streptomyces lividans

【基金项目】

：

九五生物技术攻关项目经费资助!( 96 c0 20 1 0 8)

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α－酰胺酶（α－ａｍｉｄａｓｅ，α－ＡＥ）催化神经和内分泌系统中活性多肽的Ｃ－端酰胺化，多多肽的生物活性至关重要。以大鼠心房组织的总ＲＮＡ为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增获得编码α－酰胺酶的ｃＤＮＡ，并进行了克隆和测序。为了使α－酰胺酶能在链霉菌中分泌表达，将其ｃＤＮＡ与链霉菌酷氮酶酶（ｍｅｌＣ１）信号的编码序列融合得到融合ｍｅｌ／ＡＥ，将ｍｅｌ／ＡＥ插入链霉菌质粒ｐＩＪ６８０，获得重组质粒ｐＩＪ

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