探讨Notch1 siRNA对体内外RPMI-8226人骨髓瘤细胞及荷瘤小鼠血管新生及肿瘤生长的影响。
方法体外采用Notch1 siRNA转染RPMI-8226细胞，ELISA方法检测细胞上清VEGF分泌变化，Western blotting检测各组细胞Notch1、VEGF蛋白表达变化；将RPMI-8226细胞皮下注射于糖尿病抵抗/重症联合免疫缺陷小鼠，建立人多发性骨髓瘤小鼠移植瘤模型，将成瘤小鼠随机分为3组：NS组(Notch1 siRNA转染)、CS组(Control siRNA转染)、UN组(未转染)，观察各组肿瘤体积变化，免疫组织化学染色法观察Notch1、VEGF及CD34变化。
结果Notch1 siRNA有效下调RPMI-8226细胞Notch1、VEGF蛋白表达；与CS组比较，在转染后48、72 h，NS组细胞培养上清液VEGF分泌量均明显下降[(120±25)ng/L∶(175±15)ng/L，t＝3.27，P<0.05；(145±24)ng/L∶(295±17)ng/L，t＝8.83，P<0.01)]；NS组肿瘤体积明显减小，13、17、21 d与CS组比较差异均有统计学意义[(1 548±218)mm3 ∶(1 820±64)mm3，t＝2.68，P<0.05；(1 200±75)mm3∶(2 180±84)mm3，t＝19.46，P<0.01；(1 150±88)mm3∶(2 250±145)mm3，t＝14.50，P<0.01]；Notch1 siRNA降低移植瘤Notch1及VEGF蛋白表达，Notchl、VEGF在NS组和CS组表达的差异具有统计学意义[(16.33±2.52)% ∶(75.33±2.52)%，t＝28.71，P<0.01；(5.00±1.00)%∶(29.67±2.08)%，t＝18.50，P<0.01]；Notch1 siRNA降低移植瘤新生血管数量，NS组微血管密度显著少于CS组[(14.67±2.52)∶(30.00±5.00)，t＝4.74，P<0.01]。
结论体外实验证实Notch1 siRNA可以降低人骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞上清VEGF分泌，体内实验证实Notch1 siRNA可以减小荷瘤多发性骨髓瘤小鼠肿瘤体积、减少移植瘤新生血管数量，提示Notch1是抗骨髓瘤血管新生的有效分子靶点。