【摘 要】
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目的 研究环境雌激素双酚A (bisphenol A,BPA)通过G蛋白偶联受体30 (G protein-coupled receptor 30,GPR30)对小鼠精原细胞系GC-1细胞的影响及发生机制.方法 (1)对GC-1细胞分
【机 构】
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汕头大学医学院,北京大学深圳医院男性生殖与遗传广东省重点实验室
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目的 研究环境雌激素双酚A (bisphenol A,BPA)通过G蛋白偶联受体30 (G protein-coupled receptor 30,GPR30)对小鼠精原细胞系GC-1细胞的影响及发生机制.方法 (1)对GC-1细胞分组(分为对照组,BPA+ICI,BPA+ICI+GPR30 siRNA,BPA+ICI+AG1478,BPA+ICI+PD98059,G-1六个组)进行处理,培养0h,24h,48h,72h,96h后采用MTT比色法检测细胞活力.(2)分别用Gpr30 siRNA沉默Gpr30基因,AG1478阻断EGFR (epidermal growth factor receptor),PD98059阻断ERK (extracellular signal-regulated kinases),然后BPA处理GC-1细胞,5min后Western blot检测ERK-1/-2磷酸化水平和Realtime PCR检测转录因子c-Fos变化程度,48h后检测周期蛋白基因Cyclin D1表达情况.结果 与对照组相比,BPA处理组促进GC-1细胞增殖,c-Fos和Cyclin D1基因表达上升(P＜0.05).细胞在上述三个水平阻断处理后,BPA不引起相应表达差异.结论 在小鼠GC-1细胞,BPA诱导GPR30转活EGFR,通过激活MAPK/ERK-c-Fos信号调节,上调周期蛋白基因Cyclin D1表达,促进细胞增殖.
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