【摘 要】
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目的 构建适于普通小鼠的癌胚抗原(CEA)阳性结肠癌细胞株.方法 以重组CEACAM5cDNA-Lentivirus慢病毒转染小鼠结肠癌CT26细胞,抗生素筛选2周,以有限稀释法获得癌胚抗原阳性细
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院西院急诊科,广西医科大学第一附属医院西院肛肠外科
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目的 构建适于普通小鼠的癌胚抗原(CEA)阳性结肠癌细胞株.方法 以重组CEACAM5cDNA-Lentivirus慢病毒转染小鼠结肠癌CT26细胞,抗生素筛选2周,以有限稀释法获得癌胚抗原阳性细胞CT26CEA,体外培养至第7代和第14代进行鉴定.用RT-PCR法和Western blot法分别检测CEACAM5 mRNA及蛋白表达,用荧光显微镜和免疫细胞化学法观察CEACAM5表达位置;并以第14代CT26CEA细胞建立BALB/c鼠皮下种植瘤模型,用活体荧光成像法和免疫组织化学染色观察瘤体CEACAM5表达情况.结果 在第7代和第14代CT26CEA细胞内可以检测到CEACAM5 mRNA及CEACAM5蛋白表达,荧光显微镜和免疫细胞化学法观察到其表达主要在细胞质,活体荧光成像法和免疫组织化学染色观察到小鼠瘤体有丰富CEACAM5表达.结论 成功构建小鼠结肠癌CT26CEA细胞株,能够在体外培养及小鼠体内稳定表达癌胚抗原,为研究正常免疫环境下癌胚抗原对结肠癌进展的影响及作用机制提供了适用工具.
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