截至2020年底，国际上已有19种转基因康乃馨品系进入商业化种植。为了实现转基因康乃馨的有效检测监管，研制检测标准样品十分必要。目前，国际上还没有该类标准品的相关报道。为此，本文研制了商业化时间最长、种植量较大的转基因康乃馨Moonlite品系质粒标准样品，使其与转基因康乃馨检测技术标准的应用相配套，为口岸转基因产品的检测监管提供必要的技术支撑。首先，将康乃馨内源ANS基因1 279 bp片段和转基因康乃馨Moonlite品系406 bp 5′端特异性序列分别插入到pcDNA3.0载体的酶切位点和距离1 kb以上的多克隆位点上，合成质粒DNA标准样品。后将质粒DNA标准样品进行稀释、分装，对其均匀性、最小取样量和短期、长期稳定性等进行测定，采用数字PCR方法对质粒DNA标准样品进行定值，并进行不确定度评估。质粒DNA标准样品pLite经全基因组测序，与公开发布的序列完全一致。均匀性实验结果表明，分别以ANS基因和Moonlite品系特异性序列为目标进行测定，F值分别为1.61和1.14,均小于95%置信区间的F值，质粒DNA标准样品足够均匀。质粒DNA标准样品的最小取样量为2μL。稳定性实验结果表明，质粒DNA标准样品pLite在45℃高温条件下，可稳定保存14 d;在26℃及以下温度条件下，可稳定保存1个月，在4℃及以下温度可稳定保存6个月，说明质粒DNA标准样品适宜运输。质粒DNA标准样品在反复冻融25次后，拷贝数浓度无显著变化。定值结果表明，质粒DNA标准样品pLite中康乃馨内源ANS基因拷贝数的参考值为（6.13±0.22）×10~6μL-1,Moonlite品系特异性序列拷贝数的参考值为（6.10±0.24）×10~6μL-1。研制的质粒DNA标准样品pLite具有良好的均匀性和稳定性，获得国家标准样品证书后，可用于转基因康乃馨Moonlite品系的检测。