离子交换高效液相色谱法分析兔肝环核苷酸磷酸二酯酶反应体系

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luoding
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目的:用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法:用Shim-Pak WAX-I柱,30 mmol/L的pH 4.0磷酸钾为流动相,洗脱速度0.5 ml/min,254 nm检测,峰面积定量。结果:上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫酸铵分级粗制兔肝PDE反应混合物中,cAMP和AMP同杂质完全基线分离;随反应进行,cAMP逐步下降,AMP上升到平台后再下降。用米氏酶的积分速度方程作图分析cAMP下降的进程曲线,发现硫酸铵分级粗制的兔肝PDE的米氏常数为负数。结论:
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