【摘 要】
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目的 探讨二氢丹参酮Ⅰ(DHTS1)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导脱髓鞘保护作用的机制.方法 DHTS1溶解于5 g/L羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中,饲喂小鼠含2 g/L cuprizone的饲料
【机 构】
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山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室神经生物学研究中心,山西晋中030619山西大同大学脑科学研究所,神经炎症及变性疾病基础与应用研究山西省重点实验室,山西大同037009;北京
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目的 探讨二氢丹参酮Ⅰ(DHTS1)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导脱髓鞘保护作用的机制.方法 DHTS1溶解于5 g/L羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中,饲喂小鼠含2 g/L cuprizone的饲料制备脱髓鞘模型,给予DHTS1处理,实验动物随机分为CMC-Na正常组、CMC-Na联合cuprizone处理组、DHTS1联合cuprizone处理组.通过固蓝(LFB)组织化学染色、免疫荧光组织化学染色检测髓鞘碱性蛋白(MBP)和髓鞘蛋白脂(PLP)的表达判断髓鞘完整性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;免疫荧光组织化学染色检测小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白钙离子结合接头蛋白分子1(Iba-1)、CD86、CD163的表达确定小胶质细胞极化情况.脂多糖(LPS)极化SIM-A9小胶质细胞,DHTS1处理,实验分为CMC-Na对照组、DHTS1对照组、CMC-Na联合LPS处理组和DHTS1联合LPS处理组.流式细胞术检测CD16/32、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)阳性细胞比例.结果 与CMC-Na联合cuprizone模型组比较,DHTS1处理明显减少cup, zone诱导的小鼠大脑胼胝体区髓鞘脱失,减少细胞凋亡,减少Iba-1+阿米巴样小胶质细胞的面积,减少CD86+细胞数目,增加CD163+细胞数目.与CMC-Na联合LPS处理组相比,DHTS1明显减少CD16/32+、TNF-α+、iNOS+小胶质细胞的百分比.结论 DHTS1可以抑制cuprizone诱导的脱髓鞘和细胞凋亡,可能与DHTS1调节小胶质细胞极化,减轻中枢神经系统炎症反应有关.
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