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为了探明miR16在体细胞重编程过程中的作用机制，构建小鼠miR-16逆转录病毒载体。根据NCBI上小鼠miR16的相关序列，从小鼠基因组中扩增miR-16核心序列并将其连接到pMD18-simple载体，对重组质粒进行双酶切回收目的片段。将目的片段与pMXs逆转录病毒载体连接，经过酶切、PCR和测序鉴定，最终构建逆转录病毒载体miR16-pMXs；采用脂质体法将miR16-pMXs转染plat-E细胞，以包装逆转录病毒颗粒；用逆转录病毒颗粒侵染小鼠胚胎成纤维细胞，在侵染后的第5天，提取被侵染细胞的总RN