【摘 要】
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目的:构建针对胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因2条shRNA的质粒表达载体.方法:以Survivin基因为靶点,通过自行设计并构建包含两段短发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA),携带有
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目的:构建针对胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因2条shRNA的质粒表达载体.方法:以Survivin基因为靶点,通过自行设计并构建包含两段短发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA),携带有各自的U6启动子和终止码、共同的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, EGFP)基因和Neo基因的pGenesil-1 Survivin shRNA载体,利用脂质体介导的方法转染人胰腺癌Bx-PC3细胞,RT-PCR观察其对Bx-PC3细胞Survivin基因表达的影响.结果:HE1质粒和HE2质粒的酶切鉴定正确,质粒转化菌液HE1、HE2进行测序分析均为插入正确的克隆质粒.胰腺癌Bx-PC3细胞转染成功,转染细胞后Survivin mRNA的表达有明显抑制.结论:实验构建针对胰腺癌细胞Survivin 基因2条shRNA的质粒表达载体成功.
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