【摘 要】
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目的 探讨肾癌患者外周血来源联合重组人纤维连接蛋白(RetroNectin)活化的杀伤细胞(RAK)体外杀伤肾癌细胞及裸鼠体内的抑瘤作用.方法 采用RetroNectin+抗人CD3单克隆抗体(CD3
【机 构】
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中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所生物治疗协作组,宝日医生物技术(北京)有限公司,日本宝生物株式会社,中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所动物室
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目的 探讨肾癌患者外周血来源联合重组人纤维连接蛋白(RetroNectin)活化的杀伤细胞(RAK)体外杀伤肾癌细胞及裸鼠体内的抑瘤作用.方法 采用RetroNectin+抗人CD3单克隆抗体(CD3mAb)+白细胞介素2(IL-2)培养肾癌患者外周血分离出的单个核细胞,培养产生RAK细胞,流式细胞仪测定细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD25、CD16、CD56,酶联免疫吸附法(ELISA)检测RAK分泌的细胞因子,乳酸脱氢酶法(LDH)定量检测RAK细胞体外杀伤肾癌细胞的能力,观察体内治疗肾癌荷瘤鼠抑瘤作用.统计学分析RAK培养前后分泌细胞因子浓度及荷瘤鼠治疗前后瘤体积的差异.结果 体外培养14 d,肾癌RAK细胞数由1×107扩增至3.2×109,以CD3+CD8+细胞为主,占50%以上,CD25表达由5%上调至36%,且能分泌高水平干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),培养上清中IFN-γ浓度900 pg/ml,TNF-α浓度90 pg/ml.RAK治疗组荷瘤鼠肿瘤平均体积为259.6 mm3,对照组为932.1 mm3,差异有统计学意义(P＜0.05),抑瘤率72.1%.结论 利用RetroNectin可以使少量外周血来源的单个核细胞生成大量的RAK细胞,RAK可以在体外杀伤肾肿瘤细胞,并能在动物体内起到抑制肾肿瘤生长的作用.
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