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目的：构建环指蛋白6（RNF6）真核表达载体，并探讨其对胰岛素受体底物1（IRS-1）的泛素化作用。方法以人cDNA为模板，PCR 扩增 RNF6全长编码基因，并将其克隆至载体质粒 pcDNA3．1-CHA 中，将重组质粒转染肝癌细胞株 HepG2，利用实时荧光定量 PCR（RT-PCR）、免疫印迹（Western blot）检测细胞内 IRS-1 mRNA 水平及其蛋白表达水平。结果携带RNF6目的基因的质粒转染 HepG2细胞48 h 后 IRS-1的 mRNA 表达水平降低，为对照组的69％，显著低