【摘 要】
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甲型流感病毒PB2蛋白627位点突变(E627K)是影响流感病毒宿主适应性和致病性的重要因素之一。本实验室前期研究分离的H3N2亚型犬流感病毒(CIV)GD02株(A/canine/Guangdong/02/2011
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室,广东省宠物工程技术研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31372448、31672563);国家重点研发计划(2016YFD0501004);公益性行业(农业)科研专项(201303042);广东省促进科技服务业发展计划项目(2013B040200032);广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室(2013A061401013)的资助
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甲型流感病毒PB2蛋白627位点突变(E627K)是影响流感病毒宿主适应性和致病性的重要因素之一。本实验室前期研究分离的H3N2亚型犬流感病毒(CIV)GD02株(A/canine/Guangdong/02/2011)PB2蛋白序列的627位点氨基酸为谷氨酸,为研究该病毒株PB2的E627K突变对小鼠致病性的影响,本实验采用反向遗传操作技术获得rGD02,并利用定点突变技术拯救了PB2 627位点发生突变的rGD02-E627K。通过接种小鼠比较rGD02和rGD02-E627K对小鼠致病性的差异,评价PB2 E627K突变对H3N2 CIV致病性的影响。结果显示,rGD02和rGD02-E627K对小鼠均无致死性(MLD50>106EID50),对小鼠增重的影响差异均不显著,而且这两株病毒对小鼠的致病性也无明显差异。表明PB2 E627K并未显著影响H3N2 CIV对小鼠的致病性,该研究建立的H3N2 CIV反向遗传操作平台和定点突变技术为该病毒后续的致病机理、基因功能研究及疫苗研制奠定了基础。
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