高活性Co^2＋-替代海因酶中Co^2＋的定量及酶学活性鉴定

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：piaoyisuifengpiao001

【摘要】

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利用产D-海因酶（HDT）的重组pE-hdt/E.coli菌株,在LB培养基中添加40μmol/L的Co^2＋,37℃培养10h,表达产物经Q-Sepharose阴离子交换剂和Phenyl-Sepharose疏水层析,获得电泳纯Co^2＋-

【作者】

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张学尧陈云霞史鹏梁爱华袁静明

【机构】

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教育部化学生物学与分子工程重点实验室,山西省长治医学院

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

D-海因酶 Co^2+-海因酶金属离子含量酶活性鉴定 D-hydantoinase Co^2＋ -hydantoinase metal ion co

【基金项目】

：

山西省自然科学基金资助项目（No.20031042）

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利用产D-海因酶（HDT）的重组pE-hdt/E.coli菌株,在LB培养基中添加40μmol/L的Co^2＋,37℃培养10h,表达产物经Q-Sepharose阴离子交换剂和Phenyl-Sepharose疏水层析,获得电泳纯Co^2＋-D-海因酶（Co^2＋-HDT）.该酶对底物DL-海因的比活性较HDT高约6倍,达21.8U/mg.可见光光谱分析表明,在498nm和568nm处呈现Co^2＋-海因酶络合物的特征性吸收峰.用ICP-AES测定纯酶金属离子含量,HDT每摩尔亚基含0.93摩尔Zn^2＋和

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